Appunti di Principi-BiolMol CTF - Capitolo3 - Omero

• Il pyrosequencing ha notevoli vantaggi perchè non necessital’utilizzo di dNTP marcati, ne di ddNTs, e non è necessaria laseparazione elettroforetica dei frammenti.• Il metodo è stato automatizzato e sono stati messi a puntosequenziatori che effettuano le determinazioni su molticampioni in parallelo, utilizzando DNA chip; in pratica in ciascunpozzetto è fissato un frammento di ssDNA. Il succedersi dellereazioni che avvengono contemporaneamentein tutti i pozzetti,il rilevamento, l’analisi e l’elaborazione dei risultati è gestito daun software dedicato, che riporta I dati in pirogrammi od intabulati riferiti a ciascun campione.• Con queste strumentazioni è possibile determinare in pocheore sequenze geniche di milioni di paia di basi.• E’ anche possibile anche effetuare contemporaneamenteun’analisi comparativa di DNA di origine diversa, e rilevare confacilità mutazioni di singole basi.