Appunti di Principi-BiolMol CTF - Capitolo3 - Omero

PCR-ARMS (Amplification RefractoryMutation System)• La metodica identifica sostituzioni nucleotidiche, piccoledelezioni od inserzioni.• La tecnica consiste nell’amplificazione del DNA mediantePCR utilizzando oligonucleotidi complementari alla sequenzanormale ed a quella mutata. Si eseguono, quindi, dueamplificazioni per ogni campione, una con i primers normali el’altra con i primers mutati. In presenza di un omozigote per lamutazione l’amplificazione avverrà solo con i primers mutatie viceversa. Nei soggetti eterozigoti per la mutazione, il loroDNA sarà amplificato con entrambi i primers.• La tecnica può rilevare una singola copia dell’allele mutato inpresenza di 40 copie dell’allele normale.