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Universidade Federal de Minas Gerais Instituto de Ciências ...

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para produzir proteína recombinante e vacina <strong>de</strong> DNA. Em 1997, Robinson e<br />

colaboradores conseguiram induzir resposta imune, em camundongos, protetora<br />

contra o tétano após a ingestão oral e intranasal com linhagens <strong>de</strong> Lactococcus<br />

lactis. Nesse trabalho pioneiro, a toxina tetânica foi produzida no citoplasma, e foi o<br />

que nos motivou a <strong>de</strong>senvolver este tipo <strong>de</strong> projeto, ressaltando que a produção do<br />

antígeno L7/L12 foi testada em três localizações celulares diferentes: no citoplasma,<br />

ancorado na pare<strong>de</strong> e secretado. Simultaneamente à aprovação pelo COFECUB, o<br />

projeto foi também aprovado pelo Ministério da Educação, Ciência e Tecnologia da<br />

França, que nos conce<strong>de</strong>u duas bolsas <strong>de</strong> pesquisa. Uma <strong>de</strong> pesquisador <strong>de</strong> alto<br />

nível e outra para pesquisador em início <strong>de</strong> carreira. Fui para a França, em<br />

novembro <strong>de</strong> 1999, acompanhado pela recém-doutora Luciana <strong>de</strong> A. Ribeiro e<br />

começamos as clonagens <strong>de</strong> L7/L12 nos vetores <strong>de</strong> expressão <strong>de</strong> L. lactis.<br />

Esse trabalho inicial resultou, até o momento, em quatro publicações, as<br />

quais <strong>de</strong>screvem as construções, a expressão em diferentes localizações, a<br />

colocação <strong>de</strong>ssa proteína sob o controle <strong>de</strong> promotores indutíveis ou constitutivos e<br />

fusões com a proteína repórter NUC. Foi a primeira vez que uma proteína<br />

ribossomal <strong>de</strong> B. abortus foi clonada e expressa em L. lactis e em diferentes<br />

localizações celulares, foi publicado na revista Applied and Environmental<br />

Microbiology e consi<strong>de</strong>rado pela ASM (American Society for Microbiology) como um<br />

dos melhores artigos do mês <strong>de</strong> fevereiro <strong>de</strong> 2002, entre todas as revistas da ASM.<br />

Apresentamos o referido trabalho em vários congressos na Europa e fomos<br />

indicados para apresentação oral no colóquio sobre bactérias lácticas realizado em<br />

Bor<strong>de</strong>aux, na França, em novembro <strong>de</strong> 2001, realizada pela Dra. Luciana. A<br />

apresentação foi um sucesso e fomos selecionados para publicar nossos resultados<br />

na revista Science <strong>de</strong>s Aliments.<br />

Na revista Biotecnologia, Ciência & Desenvolvimento, in<strong>de</strong>xada para o AGRIS<br />

(International Information System for the Agricultural Sciences and Technology) da<br />

FAO e para a AGROBASE (Base <strong>de</strong> Dados da Agricultura Brasileira), publicamos os<br />

primeiros resultados da imunização feita em nosso laboratório pela então aluna <strong>de</strong><br />

mestrado Daniela Santos Pontes. Os resultados são animadores: conseguimos<br />

proteção significativa nos experimentos com a expressão <strong>de</strong> L7/L12 na forma<br />

citoplasmática. Este trabalho foi publicado ao final do mês <strong>de</strong> abril <strong>de</strong> 2004, no<br />

periódico Journal of Drug Targeting. Não conseguimos proteção com as construções<br />

que secretam ou apresentam esse antígeno ancorado na pare<strong>de</strong> celular,<br />

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