Medical and Biological Sciences XXII/1 - Collegium Medicum ...

68Marta Pokrywczyńska i in.Fot. 1. Wyspy trzustkowe wybarwione ditizonem (pow. 100x)przed (A) oraz po oczyszczaniu w gradiencie gęstości(B)Photo 1. Dithizon-stained pancreatic islets (mag. 100x)before (A) and after(B) density gradient purificationFot. 3. Ocena żywotności wysp trzustkowych (barwieniePI/FDA). Wyspy trzustkowe o żywotności 95% (A)oraz 50% (B). Komórki żywe mają kolor biały (kolorrzeczywisty jest zielony, barwienie FDA), a komórkimartwe kolor szary (kolor rzeczywisty jestczerwony, barwienie PI)Photo 3. Evaluation of islet viability (PI/FDA staining). 95%(A) and 50% (B) islet viability. Viable cells arewhite (the real color is green, FDA staining) andnon-viable cells are grey (the real color is red, PIstaining)DYSKUSJABFot. 2. Ocena czystości wysp trzustkowych (pow. 40 x). Wyspytrzustkowe o czystości 95% i 50% (B)Photo 2. Evaluation of islet purity (mag. 40 x). 95% (A) and50% (B) islet purityNa wynik izolacji wysp trzustkowych wpływająprawidłowo przeprowadzona pankreatektomia, czasenzymatycznej hydrolizy tkanki oraz efektywnośćoczyszczania wysp trzustkowych w gradiencie gęstości.Prawidłowe wycięcie trzustki szczura wymagaznajomości odmian anatomicznych trzustki szczurai jej przewodów. Nastrzyknięcie trzustki roztworemenzymu trawiennego pozwala na łatwiejsze odróżnienietkanki trzustki od otaczającej ją sieci naczyńkrwionośnych i krezki jelita cienkiego. Prawidłowewypreparowanie gruczołu zwiększa wydajność izolacji.Obecność obfitej sieci naczyń krwionośnych orazwynaczynień w obrębie wyciętej trzustki wpływająnegatywnie na wynik izolacji. Białka zawarte we krwiobniżają efektywność trawienia enzymatycznego.Obecność tkanki tłuszczowej wpływa negatywnie nażywotność wysp trzustkowych. W wyniku trawieniaenzymatycznego tkanki tłuszczowej powstaje szereg