charakterisierung von organellen und signalwegen des thrombozyten

2. Einleitung
gehalten und wird in Zukunft wichtige Werkzeuge für das Verständnis von
Thrombozytenpathologien liefern (Gawaz et al. 2006).
Transkriptom- und Proteom-Studien liefern umfangreiche Einblicke in Thrombozyten-
Signaltransduktions-Prozesse. Es wird angenommen, dass Thrombozyten Proteom-
Studien („Proteomics“) für die Untersuchung von komplexen Prozessen der
Thrombozytenfunktion durch die Identifikation neuer plättchen-exprimierter Proteine,
die Aufklärung von metabolischen Signalwegen und die Analyse funktioneller
Änderungen des Plättchen Proteoms im gesundem und im pathologischem Zustand,
von erheblicher Bedeutung sein werden.
Auf der Transkriptom Ebene sind Methoden wie „serial analysis of gene expression“
(SAGE) und Mircroarray Technologie für die Untersuchung von mRNA in
Thrombozyten unerlässlich (Bugert et al. 2003) (Gnatenko et al. 2003) (Rox et al.
2004) (McRedmond et al. 2004) (Dittrich et al. 2006) (Healy et al. 2006) (Hillmann et
al. 2006). Während das Transkriptom einer Zelle die Gene definiert, die exprimiert
werden, sind die kodierten Proteine für den Großteil der zellulären Funktionen
verantwortlich. Während der letzten 20 Jahre haben verschiedene Forschergruppen
Daten über das Thrombozyten Proteom gesammelt, wobei die unterschiedlichen
Aspekte der Plättchen und ihrer Signalnetzwerke fokussiert wurden (Dittrich et al.
2005) (Gnatenko et al. 2006). Zwei-dimensionale Polyacrylamidgel-Elektrophorese
(2-DE) in Kombination mit Massenspektrometrie (MS) haben sich in diesem
Zusammenhang zu den am weitesten verbreiteten Techniken zur Separierung von
komplexen Proteingemischen entwickelt (Marcus et al. 2000) (O’Neill et al. 2002)
(Garcia et al. 2004). Neue Bemühungen zur Präfraktionierung von Thrombozyten vor
der MS-Analyse (Moebius et al. 2005) (Maynard et al. 2007) und zur Untersuchung
von Modifikationen von humanen Thrombozytenproteinen wie Phosphorylierung
(Maguire et al. 2003) (Marcus et al. 2003) (Garcia et al. 2004) (Garcia et al. 2006)
(Zahedi et al. 2006) (Zahedi et al. 2007) und Glykosylierung (Lewandrowski et al.
2006) (Lewandrowski et al 2007) wurden durchgeführt.
Während für alle „large-scale“ mRNA Techniken, einschließlich SAGE und
Mircoarray, die Präparationen der Thrombozyten normalerweise auf
Kontaminationen mit anderen Blutzellen untersucht werden, gibt es aktuell keinen
Standard für eine Reinheitskontrolle für Techniken zur Proteomanalyse. Es existieren
nur wenige Daten, die eine Restkontamination mit Erythrozyten und Serumproteinen
in Erwägung ziehen. Auch sollte eine mögliche Thrombozytenaktivierung während
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