charakterisierung von organellen und signalwegen des thrombozyten

4. Ergebnisse
Die Abbildung 4-11 zeigt unter P100.000 eine Western-Blot-Analyse der Fraktion, die
anschließend unter den Sucrose-Gradienten geschichtet wurde. Die folgenden
Fraktionen zeigen die Verteilung von Membran-Vesikeln über den Gradienten nach
Zentrifugation. Anhand des Proteins Integrin �3 konnten die Fragmente detektiert
werden (Abb. 4-11). Eine große Menge fand sich in den Fraktionen 2 und 3 und dann
wieder in den Fraktionen 9 und 10. Zur näheren Charakterisierung dieser Fraktionen
wurden weitere immunobiochemische Untersuchungen durchgeführt.
So fand man das �-Granula-Marker-Protein P-Selektin ebenfalls in diesen vier
Fraktionen. Weiterhin fanden sich geringe Mengen des Zytoskelett-Proteins Aktin in
der Fraktion 3 und etwas höhere Mengen in der Fraktion 10. Eine ähnliche Verteilung
konnte für den IP3-Rezeptor, der im Endoplasmatischen Retikulum lokalisiert ist,
gezeigt werden, da hierbei auch geringe Mengen in der Fraktion 3 und sehr große
Mengen in der Fraktionen 9 und 10 nachweisbar waren. Eine gegensätzliche
Aufteilung war für die Integrin-linked Kinase (ILK) zu beobachten, da dieses Protein
lediglich in der Fraktion 3 in geringer Menge detektiert werden konnte und ansonsten
in keiner weiteren Fraktion (Abb. 4-11).
Proteine wie GAPDH, welches ausschließlich im Zytoplasma vorkommt, konnten
weder im Gradienten-Auftrag P100.000, noch in einer Faktion des Gradienten nach
Zentrifugation entdeckt werden (Abb. 4-11). Auch die mitochondrial lokalisierten
Proteine TIM23, Prohibitin, TOM70 waren bereits im Gradientenauftrag nicht
vorhanden und somit auch nicht in den verschiedenen Fraktionen des Gradienten
(Abb. 4-11).
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