charakterisierung von organellen und signalwegen des thrombozyten

1. Abstract / Zusammenfassung
the IPP-complex (ILK-PINCH-Parvin). This ternary complex functions as a signaling
platform for integrins by interfacing with the actin cytoskeleton. Based on the
particular proteins ILK and PINCH it is possible to generate an entire signal
transduction cascade in a model, which leads to actin-polymerisation. In the
laboratory these interactions in platelets were verified by immunoprecipitation and
western-blotting for the first time.
Therefore, the established platelet-interactome can be used for systematic „target
screening“. By this means it would be possible to identify potentially new receptors,
proteins or even whole signaling cascades. Thus, the interactome provides a suitable
base for assembling more complex interaction-models by including new data. In the
future this will be of high relevance also in clinical applications, if the importance of
these interactions for signaling pathways in hemostasis will be considered.
1.2 Zusammenfassung (deutsch)
In den letzten Jahren hat sich das gemeinhin gültige Bild von Thrombozyten, in dem
die Blutplättchen eine eher passive Rolle als Bestandteil der Koagulations-Kaskade
inne hatten, hin zu einem Modell gewandelt, in dem ihnen eine aktive Rolle
zugeschrieben wird. Diese ist von besonderer Bedeutung in Hinblick auf die
Produktion humoraler Faktoren, die sowohl die Bildung von Blutgerinnseln als auch
Entzündungsvorgänge potenzieren. Letzteres ist von besonderer Relevanz bei
kardiovaskulären Erkrankungen, wie Myokardinfarkt, Schlaganfall und peripherer
arterieller Verschlusskrankheit. Darüber hinaus wurden mittlerweile neue
Eigenschaften der Thrombozyten beobachtet, die auf deren Beteiligung bei
Krebserkrankungen, Infektionen und Morbus Alzheimer schließen lassen.
In der Forschung – und im weitesten Sinne auch in klinischen Anwendungen –
werden heute zur näheren Erforschung der Thrombozyten sowohl das Proteom
betreffende Analysemethoden, als auch auf PCR basierende Techniken, wie SAGE
und qRT-PCR eingesetzt. Für diese Techniken ist die Reinheit der verwendeten
Thrombozyten-Präparationen von besonderer Wichtigkeit.
Im Rahmen dieser Arbeit, entwickelte ich eine neue, effektive und effiziente Technik
zur Aufreinigung humaner Thrombozyten. Ich erzielte hochreine Thrombozyten-
Präparationen mit weniger als 1,5 kontaminierenden Leukozyten pro 10 8
Blutplättchen. Überdies erwiesen sich die aufgereinigten Thrombozyten-
Präparationen als frei von kontaminierenden Erythrozyten und Plasma Proteinen.
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