charakterisierung von organellen und signalwegen des thrombozyten

4.1.1 Nachweis der Thrombozyten-Reinheit
4. Ergebnisse
Präparationen von allgemein angewandten gewaschenen Plättchen enthalten
beträchtliche Anteile an Leukozyten und Serumproteinen. Um die Reinheit der
hochreinen Plättchen möglichst genau zu verifizieren, wurden Techniken mit einem
sehr sensitiven Detektions-Grenzwert verwendet. Da Albumin das in größter Menge
im Blut vorkommende Protein ist, stellt es somit auch einen sensitiven Marker für
Serumproteine im Allgemeinen dar. Daher wurde der Albumingehalt der
Präparationen mittels eines hoch sensitiven Nephelometers bestimmt (Thomas et al.
1990). Die Albumin-Messungen ergaben einen Gehalt von 405,5 � 4,1 µg/ml, was
einer Menge von 203,4 ��16,2�µg Albumin pro 10 9 Thrombozyten für eine
Standardpräparation von gewaschenen Plättchen (WP) aus frisch isolierten
Thrombozyten entspricht. Vergleichbare Werte wurden für Präparationen aus
Thrombozyten-Konzentraten erzielt: 380,8 ��8,3 µg/ml entsprechen 260,0 ��2,81 µg
Albumin pro 10 9 Thrombozyten. Mit Hilfe der neu entwickelten Aufreinigungsmethode
ist es möglich den Albumingehalt aus den gewaschenen Plättchen (WP) sowohl in
den Vollblut-Proben als auch in den Thrombozyten-Konzentrat-Proben zu
eliminieren, so dass kein Albumin in den Proben W4 gemessen werden kann (Abb.
4-5). Bei einem Detektionslimit von 2 µg/ml für die nephelometrische Messung, ergibt
sich ein Aufreinigungsfaktor von 200 für isolierte Thrombozyten aus Vollblut und von
190 aus Thrombozyten-Konzentraten.
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