charakterisierung von organellen und signalwegen des thrombozyten

4. Ergebnisse
Integrin-Signaltransduktion und dem Aktin-Zytoskelett (Legate et al. 2006) und wurde
kürzlich als kritischer Regulator in Herzzellen beschreiben (Hannigan et al. 2007).
Dieses bis dahin nur theoretisch entworfene Subnetzwerk um den IPP-Komplex
(Abb. 4-13) wurde als nächstes experimentell analysiert.
Abbildung 4-13: Der IPP (ILK-PINCH-Parvin)-Komplex und ein Teil des Thrombozyten
Interaktionsnetzwerkes. Alle direkten Interaktionspartner von ILK, PINCH (LIMS1) und Parvin (� and
�) wurden aus unserem in silico Interaktom extrahiert. Gestrichelte Linien stellen Interaktionen dar, die
durch large scale Y2H Daten gewonnen wurden und durchgezogene Linien deuten auf Interaktionen
hin, die aus Literaturdaten entnommen wurden. Diese Daten aus anderen Zelltypen legen nahe, dass
auch im Thrombozyten die Interaktionen von ILK und PINCH experimentell zu prüfen sind (fette
durchgezogene Linie) Farbgebung: Aus SAGE-Analysen gewonnene Daten (grün), Proteomdaten
(gelb), sowohl aus SAGE- als auch aus Proteom-Analysen gewonnene Daten (blau), weiß hinterlegte
Proteine sind potentielle Interaktionspartner, aber die Existenz ist in Thrombozyten bisher nicht
beschreiben. (Dittrich et al. 2008) (Abk.: s. Anhang)
Während das Protein ILK bereits in Thrombozyten beschrieben wurde (Barry et al.
2002), ist PINCH bisher nur in humanen 293 embryonalen Nierenzellen (Tu et al.
1998) und �-Parvin in humanen intestinalen glatten Muskelzellen und Fibroblasten
aus Rattenembryonen (Nikolopoulos et al. 2000) nachgewiesen worden. Daher
wurden zunächst hochreine Plättchen auf das Vorhandensein dieser beiden IPP-
Komplex-Komponenten mittels Western-Blot Analyse untersucht (Birschmann*,
Mietner* et al. 2008) (Abb.4-14), damit anschließend der gesamte Komplex näher
analysiert werden konnte. Das Vorhandensein von ILK in hochreinen Plättchen
konnte entsprechend bestätigt werden (Daten nicht gezeigt).
Die Abbildung 4-14A zeigt zwei Agarose-Gele zum Nachweis von PINCH und �-
Parvin mittels PCR-Analyse (3.7.11). Hierfür wurden Gen-spezifische Primer zum
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