Lebenslauf - OPUS - Universität Würzburg

3. Material und Methode
Signalauswertung. Hierbei wird die Zellsuspension in eine Kapillare definierter
Geometrie gesaugt, in der während der Messung über zwei Platinelektroden eine
Spannung angelegt ist. Beim Durchtritt durch die Messkapillare verdrängen die
Zellen eine ihrem Volumen entsprechende Menge an Elektrolytlösung.
Folglich ändert sich dadurch entlang der Kapillarstrecke der Widerstand, über den
der Zellzähler die Zellzahl und das Volumen ermitteln kann.
Durchführung
Die Zellzahl wurde am Tag 3, 5, 7 und 10 nach Aussaat bestimmt.
Das vorgelegte Medium wurde zunächst abgezogen und die Zellschicht zweimal mit
je 1 ml PBS-Puffer gewaschen. Anschließend wurden je 500 µl Accutase zupipettiert
und bei 37 °C und 5%iger CO2-Atmosphäre für weitere 7 min inkubiert. Durch
Zugabe von je 500 µl DMEM-Medium pro Well wurde die Reaktion zum Stoppen
gebracht. Nach 20-maligem Aufziehen der Suspension mittels einer Eppendorf-
Pipette zur Durchmischung wurden 100 µl in 10 ml sterile isotonische Lösung
gegeben und im Zellzähler gemessen.
Die Ergebnisse wurden mittels OriginPro 8G graphisch dargestellt.
3.2.12 Elektronenmikroskopische Analyse der Oberflächen
Zur Beurteilung des Zementgefüges der verschiedenen Zemente sowie des
Wachstums von Bakterien bzw. Osteoblasten auf den Prüfkörpern wurden mit Hilfe
des Rasterelektronenmikroskops DSM 949 (Carl Zeiss AG, Oberkochern)
repräsentative Aufnahmen gemacht. Man verwendete dafür zum einen die durch die
Druckfestigkeitsmessung zerbrochenen Prüfkörper und zum anderen die für die
Rasterelektronenmikroskopie angesetzten Proben.
Da für eine Untersuchung im Rasterelektronenmikroskop das zu untersuchende
Objekt im Hochvakuum mit Elektronen beschossen wird, ist eine Reihe von
Bedingungen einzuhalten. Das zu untersuchende Objekt darf weder beschädigt noch
verunreinigt sein. Es darf zu keiner Formveränderung des Objekts oder Ausgasen
kommen. Die Elektronen müssen auf eine elektrisch leitende Oberfläche auftreffen
und dürfen nicht durch störende Aufladungen abgelenkt werden. Daher wurden die
Zementkörper mit Gold beschichtet. Die Bakterien bzw. Osteoblasten wurden vor der
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