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Aplicabilidad <strong>de</strong>l método <strong>de</strong> “alta presión hidrostática”<br />

(HHP) <strong>en</strong> la mejora <strong>de</strong> la congelabilidad <strong>de</strong> ovocitos y<br />

embriones bovinos producidos in vitro con sem<strong>en</strong><br />

sexado<br />

Refer<strong>en</strong>cia: RZ2008-00014. Organismo financiador: Instituto Nacional <strong>de</strong> Investigación<br />

y Tecnología Agraria y Alim<strong>en</strong>taria . Importe: 66.000 €. Duración: 2008-2011.<br />

Equipo investigador<br />

Carm<strong>en</strong> Díez Monforte SERIDA<br />

Enrique Gómez Piñeiro SERIDA<br />

Marta Muñoz Llamosas SERIDA<br />

Paloma Duque Álvarez CEFIVA<br />

Carlos Ochoa García <strong>de</strong>l Fresno CEFIVA<br />

Equipo técnico<br />

Susana Carrocera Costa SERIDA<br />

Entida<strong>de</strong>s Colaboradoras<br />

Luis José Royo Martín SERIDA<br />

Csaba Prib<strong>en</strong>szky Departm<strong>en</strong>t of Animal Husbandry and G<strong>en</strong>etics, Faculty of<br />

Veterinary Sci<strong>en</strong>ces of Budapest (Hungría)<br />

Avance <strong>de</strong> resultados<br />

Para el estudio <strong>de</strong> los efectos <strong>de</strong>l tratami<strong>en</strong>to <strong>de</strong> alta presión hidrostática (HHP)<br />

sobre la crio-s<strong>en</strong>sibilidad <strong>de</strong> los ovocitos, complejos cumulus-ovocito bovinos<br />

proced<strong>en</strong>tes <strong>de</strong> mata<strong>de</strong>ro y madurados in vitro (MIV) durante 22 h, se sometieron a un<br />

tratami<strong>en</strong>to <strong>de</strong> presión <strong>de</strong> 20 MPa, durante 1 hora a 27º C. Tras 1 h <strong>de</strong> recuperación,<br />

se vitrificaron por el método <strong>de</strong> fiberplugs. Tras la <strong>de</strong>svitrificación, los ovocitos se<br />

evaluaron morfológicam<strong>en</strong>te y se sometieron a fecundación in vitro (FIV) o a activación<br />

part<strong>en</strong>og<strong>en</strong>ética y se cultivaron para evaluar su capacidad <strong>de</strong> <strong>de</strong>sarrollo. Se analizó<br />

asimismo la expresión <strong>de</strong> Heat Shock Proteins (Hsp70 y Hsp 90) <strong>en</strong> ovocitos.<br />

Aunque la vitrificación redujo significativam<strong>en</strong>te la capacidad <strong>de</strong> <strong>de</strong>sarrollo <strong>de</strong> los<br />

ovocitos, la vitrificación con fiberplugs posibilitó una rápida manipulación <strong>de</strong> las<br />

muestras y disminuyó la relación volum<strong>en</strong> <strong>de</strong> solución/ número <strong>de</strong> especím<strong>en</strong>es<br />

vitrificados, lo que mejoró las tasas <strong>de</strong> superviv<strong>en</strong>cia con relación a la técnica Op<strong>en</strong><br />

Pulled Straw. No obstante, el tratami<strong>en</strong>to <strong>de</strong> los ovocitos con HHP no mejoró su<br />

superviv<strong>en</strong>cia a la vitrificación tras FIV o activación part<strong>en</strong>og<strong>en</strong>ética.<br />

Con el fin <strong>de</strong> poner a punto la metodología a<strong>de</strong>cuada para <strong>de</strong>terminar si la<br />

aplicación <strong>de</strong> altas presiones favorece la síntesis <strong>de</strong> las Hsp (Hsp70 y Hsp 90) <strong>en</strong> los<br />

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