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ovocitos, se analizó la expresión de las citadas proteínas por técnicas de western blot
(WB) e inmunocitoquímica (ICQ). Para ello, fue precisa la adaptación de protocolos
convencionales de WB a los diferentes tipos de muestras y condiciones
experimentales. Gracias a estos trabajos hemos establecido una serie de parámetros
(número de ovocitos/ muestra, dilución de anticuerpos primarios y anticuerpos
secundarios) fundamentales para realizar el análisis de expresión de las Hsp en
ovocitos. También se ha establecido el protocolo para cuantificar los resultados
obtenidos de WB, mediante el uso del programa de procesamiento de imágenes
ImageJ. Además, con el fin de establecer el patrón de distribución espacial de las
proteínas Hsp en las muestras, se han adaptado protocolos de inmunocitoquímica
tradicionales.
Los resultados preliminares obtenidos confirman los resultados obtenidos
mediante WB, que parecen indicar la existencia de una expresión diferencial de Hsp70
en los ovocitos tratados con HHP y sus respectivos controles no tratados.
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