Cancer du sein et micro-environnement tumoral: rôle de la protéase ...

51 kDa, et possède 18 résidus (27-44) du pro-fragment résultant du clivage de ce pro-peptideentre la Leucine 26 et lIsoleucine 27 (Capony et al., 1987; Richo and Conner, 1994).Cependant, cet intermédiaire de 51 kDa na pas encore été observé in vivo (Laurent-Matha etal., 2006; Richo and Conner, 1994).Le site catalytique de la cath-D contient deux acides aspartiques (33 et 231) situés dans uneséquence bien conservée de type Asp-Thr-Gly et localisés respectivement sur les chaînes 14 et34 kDa. Daprès létude de la structure tridimensionnelle de la cath-D de 48 kDa parcristallisation, ces deux acides aspartiques situés au niveau du site catalytique se font face(Metcalf and Fusek, 1993; Metcalf and Fusek, 1995).A lheure actuelle, aucun inhibiteur endogène de lactivité protéolytique de la cath-D na étéencore mis en évidence dans les cellules mammifères. Cependant, une étude récente à révéléque la maspine, une protéine sécrétée inhibe la dégradation de la matrice extra-cellulaire parde la cath-D (Khalkhali-Ellis and Hendrix, 2007). Toutefois, le mécanisme précis de cetteinhibition reste à être déterminé car aucun effet direct na été démontré. Le seul inhibiteurnaturel des aspartyl-protéases, la pepstatine A, a été isolé à partir dactinomycètes (Umezawaet al., 1970). Il est utilisé en routine pour étudier la fonction de la cath-D in vitro et pour sapurification par chromatographie daffinité (Metcalf and Fusek, 1993). La cristallisation de laforme mature active (Baldwin et al., 1993) et de la forme inhibée par la pepstatine A de lacath-D humaine (Metcalf and Fusek, 1993) montre lexistence de similitudes entre la structure3D de la cath-D et celle des autres aspartyl-protéases (la pepsine, la rénine et la protéase duvirus HIV, par exemple). Ces enzymes adoptent une structure bilobulaire. A lheure actuelle,il nexiste pas de structure 3D de la forme précurseur de la cath-D.c. Adressage lysosomalLa maturation intracellulaire de la pro-cath-D se déroule lors de son routage vers leslysosomes et comprend plusieurs étapes conduisant à la synthèse dune enzyme active(Erickson, 1989). Lors de son transit dans lappareil de golgi, la pro-enzyme est glycosyléesur certains résidus asparagine par addition doligosaccharides de type oligomannosique. Elleest ensuite reconnue de façon concertée par deux enzymes qui assurent la formation du signalMannose-6-Phosphate (M6P) (Baranski et al., 1992; Cantor et al., 1992) qui permettra laliaison ultérieure des hydrolases à des récepteurs du Mannose-6-Phosphate (RM6P)spécifiques dans le réseau trans-Golgien qui assurent son transport vers les lysosomes(Kornfeld, 1990) (Figure 13).37