Эффективное животноводство №4 (161) июнь 2020

ЭФФЕКТИВНОЕ
ЖИВОТНОВОДСТВО
№ 4 июнь
2020
143
супероксиддисмутазы, образование дерманекротоксина
и гиалуронидаза. Наличие капсулы является
одним из факторов вирулентности. По капсульному
антигену пастереллы разделены на четыре
серологические группы А, В, Д и Е. Отмечено, что
чаще всего пастереллез у птиц вызывает типа А.
К Pasteurella multocida относится более чем 16 сероваров,
многие из которых вызывают заболевания
только у определенного вида животного или птицы.
Так, например, серовары А:1 и А:3 – являются
основными возбудителями пастереллеза птиц [3].
Совокупность генов этого вида пастерелл показаны
одиночной циркулярной хромосомой длиной
2.257.487 пар нуклеотидов и содержит 2.014 кодирующих
4 регионов, средний размер которых 998 п.н.
(в сумме 89% всей хромосомы). Оставшиеся 11%
генома представлены шестью оперонами рибосомальной
РНК (16S-23S-5S) и 57 генами тРНК, представляющими
все 20 аминокислот, и относительно
небольшим количеством не кодирующих элементов
[4]. Сравнительный анализ первичной структуры микроорганизма
выявил присутствие более двухсот
кодирующих участков (11%), исключительных для
этого вида P. multocida. Проведение исследования
генетической системы биосинтетического локуса
капсулы были обнаружены зоны генома, отмеченные
в настоящее время как гены hyaD, bcbD, dcbF,
ecbJ и fcbD, высоко специфичные для любой из 5
серогрупп (А, В, D, Е и F) P. multocida и ассоциированные
с синтезом характерного для каждой серогруппы
капсульного вещества, что обеспечивает
генетическую основу для серологической дифференциации
штаммов микроорганизма [5].
На рисунке 1 изображено циклическое представление
генома Pasteurella multocida (Pm70), на котором
по внешнему кругу расположены пары базовых
нуклеотидов. Наружные стрелки ориентируют на 57
оперонов tRNA, а внутренние стрелы показывают 6
оперонов rRNA (16S-23S-5S). В центральном круге
представлено процентное соотношение пары ГЦ к
паре АТ: наиболее яркий розоватый фрагмент предполагает
собою соответствие ГЦ вплоть до 26-31%
в то время как самый темный фрагмент обозначает
44-51%. Данные были получены в базе genescene
программного обеспечения (DNAstar).
Пастереллез встречается повсюду, однако больше
фиксируется в странах с тропическим и субтропическим
климатом. Диагноз пастереллеза ставится
комплексно, с учетом данных эпизоотологии, клинической
картины заболевания, данных патологоанатомических
изменений и бактериологического
исследования. Любой из способов диагностики обладает
значимостью только вместе с остальными
методами диагностики с обязательным учетом результатов
патологоморфологических и лабораторных
исследований. С целью бактериологического
изучения в лабораторию посылают отдельные органы.
Получение культуры пастерелл путем бактериологического
исследования без учета результатов,
полученных другими диагностическими методами,
также не дает оснований для постановки диагноза
на это заболевание, так как при пастереллезе
наблюдается широкое бактерионосительство
как среди переболевших, так и среди клинически
здоровых животных, контактировавших, иногда и
неконтактировавших с животными неблагополучных
хозяйств. Совокупность сведений по эпизоотологии,
клинической и патологоанатомической картине
дает право на постановку предварительного
диагноза, результаты же бактериологических и биологических
исследований позволяют поставить диагноз
окончательно.
ПЦР-диагностирование дает возможность устанавливать
напрямую возбудителя болезни. Значительная
особенность метода ПЦР определена тем,
что в исследуемом материале обнаруживается
оригинальный, типичный только лишь для данного
возбудителя участок ДНК. Существенная чувствительность
данного метода дает возможность обнаруживать
даже незначительное количество микроорганизмов.
Так же одним из преимущества этого
метода является его достаточно быстрая скорость
в получении результатов исследования, что позволяет
в свою очередь выявлять и диагностировать
бактерионосительство.
Анализ проведенных исследований учеными разных
стран показывает, что молекулярные методы
выявления и типирования Pasteurella multocida превосходят
обычные методы в случае необходимости
быстрых эпизоотологических исследований геморрагической
септицемии и могут использоваться в
эпизоотологических исследованиях как программа
мониторинга.
Сопоставляя молекулярно-биологические методы
генотипирования на основе ПЦР методам классическим
можно отметить, что данные метод отличается
универсальностью, наиболее полной степенью
дифференциации, перспективой применения количественных
способов с целью оценки идентичности
штаммов также существенной воспроизводимостью.
Анализируя литературные данные по изучению
генома Pasteurella multocida можно отметить следующие
гены для дальнейшего изучения: ген папН,
гены lpp\-5 (pip А-Е), локус генов cap, гены IpsA и
galE. Последующие исследования этих генов позволят
получит специфические праймеры для амплификации
участка геномной ДНК возбудителя
пастереллеза птиц.
Статья написана по госзаданию 0599-2019-0025
ЛИТЕРАТУРА
1. Новикова О.Б. Актуальные и новые болезни птиц бактериальной
этиологии / Новикова О.Б., Павлова М.А.
// Актуальные вопросы сельскохозяйственной биологии.
– 2017. – № 4 (6). – С. 40-44.
2. Чужебаева Г.Д. Диагностика пастереллеза крупного
рогатого скота методом ПЦР / Монография Г.
Д. Чужебаевой // Костанай:Костанайский государственный
университет имени Ахмета Байтурсынова.
– 2017. – 106с.
3. Peng 2, Liang W., Wang Y. et al. Experimental pathogenicity
and complete genome characterization of a pig origin
Pasteurella multocida serogroup F isolate HN07 // Vet.
Microbiol. – 2017. – Vol. 198. – P. 23-33.
4. Adhikary S., Bisgaard M., Foster G. et al. Comparative
study of PCR methods to detect Pasteurella multocida //
Berl. Munch. Tierarztl. Woch-enschr. – 2013. – Vol. 126.
– P. 415422.
5. Wilkie I.W., Harper M., Boyce J.D., Adler B. Pasteurella
multocida: diseases and pathogenesis // Curr. Top.
Microbiol. Immunol. 2012. – Vol. 361. – P. 1-22.