istraživača (Damboldt 1965, Eddie i Ingrouille 1999), prema kojima su specifičnekarakteristike cvijeta jako važne u determinaciji vrste gube i postaju neprepoznatljiveklasičnim herbariziranjem. Na žalost, većinu vrsta sakupljenih (ljubaznošću kolega)izvan prostora Hrvatske nije bilo moguće transporitirati drugačije nego u oblikuherbarskog materijala, te je stoga pet populacija uključeno u morfometrijskoistraživanje prethodno herbarizirano, kao što je naznačeno u Prilogu 5. Usporedbenamorfometrija cvjetova tako u konačnici obuhvaća tri iz<strong>of</strong>iloidne vrste (dvije agregataWaldsteiniana, jednu Pyramidalis), devet heter<strong>of</strong>ilnih i dvije iz<strong>of</strong>ilne.Prvobitna namjera bila je u svakoj populaciji uzeti uzorke s po 20 odraslih i sasvimzdravih jedinki (po dva sasvim rascvjetana cvijeta), međusobno dovoljno udaljenih dase može pretpostaviti kako ne predstavljaju klonsku populaciju, kako bi uzorak bioujednačen. Međutim, s obzirom na to da su pojedine populacije bile vrlo malobrojne,te su kao takve i zaštićene u sklopu nacionalnih parkova ili parkova prirode, od togsam pravila povremeno morala i odstupati. Tako je najmanja populacija zastupljena sasamo dvije jedinke (dva cvijeta), a dvije najveće s po 24 cvijeta, te ukupni uzorak zamorfometrijsku analizu nije mogao biti ujednačen. U svakom slučaju, populacija se priuzorkovanju nastojala što manje oštećivati, odnosno uzimalo se samo onoliko uzoraka(cvijet, list, bazalne reznice) koliko ne šteti daljnjem životu jedinke, a samo je do petprimjeraka po populaciji herbarizirano (voucher).Biljni materijal za DNA analizuU središtu DNA istraživanja našle su se ukupno 23 vrste (tablica u Prilogu 5)zvončića iz ciljnog podučja primorskih Dinarida, ali i šire, koje predstavljaju nekolikoevolucijskih linija roda Campanula. DNA analiza usmjerena je na zvončiće«iz<strong>of</strong>iloidnih» agregata (u smislu Geslota 1984) Waldsteiniana (Campanulawaldsteiniana, C. tommasiniana) i Pyramidalis (C. pyramidalis), iz<strong>of</strong>ilne vrste serije (usmislu Trinajstića 1978) Garganicae, te izbor heter<strong>of</strong>ilnih vrsta iz agregata Rotundifolia(uglavnom ovisno o dostupnosti materijala) primorskih Dinarida i srednje Europe. Kaokontrolna uključena je vrsta Edraiantus tenuifolius.Ukupne stanične DNA izolirane su iz lisnih tkiva istraživanih svojti. Do 100 mgodraslih i sasvim zdravih listova s iste biljke odstranjeno je pincetom i po<strong>hr</strong>anjeno uplastičnu vrećicu ili u silika-gel (samo kad je terensko istraživanje bilo višednevno),ako je bilo moguće na prirodnom lokalitetu, kad i cvjetovi za morfološka mjerenja.20
Listovi za DNA-izolaciju prikupljeni su većim dijelom na prirodnim staništima, a manjimnaknadno, s biljaka uzgojenih iz reznica ili sjemenki skupljenih na prirodnim staništima(DNA izolirana iz herbarskog materijala zbog svoje se degradiranosti pokazalanepogodnom za RFLP analizu kloroplastne DNA).Uzgoj i po<strong>hr</strong>ana materijalaZa vrijeme skupljanja biljnog materijala za potrebe morfometrijskih i DNA analizana svakom sam lokalitetu s po nekoliko zdravih i dobro razvijenih biljaka premanačelima vrtlarstva uzela i po nekoliko bazalnih reznica, koje su zakorjenjivane uBotaničkom vrtu PMF-a. Pri uzgoju zvončića iz sjemenki i reznica skupljenih naprirodnim lokalitetima, te iz sjemenki dobivenih razmjenom s drugim botaničkimvrtovima putem publikacija Delectus Seminum (Prilog 5), primijenjene su klasičnehortikulturne tehnike iz specijalizirane literature (Crook 1951, Lewis i Lynch 1998,Eddie 2000).Sve biljke uzete s prirodnih staništa, uzgojene iz sjemenki/reznica skupljenih naprirodnim staništima ili dobivene razmjenom s drugim botaničkim vrtovima nalaze se uuzgoju Botaničkog vrta PMF-a u Zagrebu ili mojoj privatnoj zbirci. Tako je do danassastavljena živa zbirka zvončića koja predstavlja stalni izvor materijala za daljnjaistraživanja, te bazu za praćenje fenologije vrsta u kontroliranim uvjetima.Ogledni (voucher) primjerci istraživanog materijala (klasično herbarizirani ili uloženiu FOA otopinu) po<strong>hr</strong>anjeni su u Botaničkom vrtu PMF-a u Zagrebu.21
- Page 1 and 2: Sveučilište u ZagrebuPrirodoslovn
- Page 3 and 4: SADRŽAJTemeljna dokumentacijska ka
- Page 5 and 6: TEMELJNA DOKUMENTACIJSKA KARTICASve
- Page 7 and 8: 1.1 Red i porodica zvončića1. UVO
- Page 9 and 10: 1.2 Rod zvončića (Campanula L.)Im
- Page 11 and 12: nije bilo poznato da postoje vrste
- Page 13 and 14: 2002), pa i u vrstama roda Campanul
- Page 15 and 16: isophylla - Prilog 1, sl. 7). Ta je
- Page 17 and 18: 2. CILJ ISTRAŽIVANJAKako je razvrs
- Page 19: Biljni materijal za morfometrijsku
- Page 23 and 24: Devet mjerenih kvantitativnih morfo
- Page 25 and 26: Elektroforeza u gelu agarozeElektro
- Page 27 and 28: Tablica 3.1. Parametrijski i nepara
- Page 29 and 30: Vrijednost Wilks' Lambda koeficijen
- Page 31 and 32: Metoda najbližeg susjeda (Neighbou
- Page 33 and 34: Tablica 4.1. Korelacije vremenskog
- Page 35 and 36: Tablica 4.3 Rezultati neparametrijs
- Page 37 and 38: 98765432dužina zubaca èaške (SEP
- Page 39 and 40: 4,54,0Mean Mean±SE Mean±SD3,5, mm
- Page 41 and 42: 5,55,0Mean Mean±SE Mean±SD4,54,03
- Page 43 and 44: 87Mean Mean±SE Mean±SD65432širin
- Page 45 and 46: 2422Mean Mean±SE Mean±SD, mm) L20
- Page 47 and 48: 2220Mean Mean±SE Mean±SD181614121
- Page 49 and 50: 1098Mean Mean±SE Mean±SD7, mm) AN
- Page 51 and 52: Rezultati Kruskal-Wallisove univari
- Page 53 and 54: Osi 1-6 imaju α ≤ 0,05, što zna
- Page 55 and 56: Slika 4.20 Scatter grafikon primjer
- Page 57 and 58: Tablica 4.7 Eigen-vrijednosti i kum
- Page 59 and 60: Metode grupiranja podataka (Cluster
- Page 61 and 62: 4.2 Analiza materijala za molekular
- Page 63 and 64: Slika 4.26. Restrikcija kloroplastn
- Page 65 and 66: Garganicae«izofiloidi»(«heterofi
- Page 67 and 68: 5. RASPRAVA5.1. Usporedbena morfome
- Page 69 and 70: pripr.), naznačuju neobičan polo
- Page 71 and 72:
sigurnošću korištene u determina
- Page 73 and 74:
Waldsteiniana imaju jasnu (mada če
- Page 75 and 76:
kao što je C. cespitosa. Ta sličn
- Page 77 and 78:
5.2 Evolucija morfoloških karakter
- Page 79 and 80:
obliku. Moja iskustva s prirodnih s
- Page 81 and 82:
Drugo, slabo poznata skupina «izof
- Page 83 and 84:
vrstama nejasne filogenije bez obzi
- Page 85 and 86:
garganica na Monte Garganu, s izraz
- Page 87 and 88:
Engelskoj naturalizirana vrsta (Cro
- Page 89 and 90:
što su im areali bili razdijeljeni
- Page 91 and 92:
6. ZAKLJUČCITemeljem provedenih us
- Page 93 and 94:
Buzas, G., 1998: Provisorischer Sch
- Page 95 and 96:
Frizzi G., Tammaro, F., 1991: Elect
- Page 97 and 98:
Kovačić, S., 2004: The genus Camp
- Page 99 and 100:
Phitos, D., Kamari, G., 1988: Contr
- Page 101 and 102:
Trinajstić, I., 1991: O problemu g