Bedeutung des C-reaktiven Proteins im Rahmen maligner ...

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Es war festzustellen, dass mehr als 60 % der Patienten mit einem postoperativen Abfall des
CRP-Plasmawertes Tumoren mit höherem Tumorstadium (T2, T3) und sogar mehr als 90 %
(90.90 %) eher undifferenzierte Tumoren (G2, G3) aufwiesen (nicht gezeigt).
3.3 Tumorzelllinien (Synthese von CRP in Karzinomzelllinien in vitro)
Eine Synthese des C-reaktiven Proteins wurde in vitro anhand von vier verschiedenen
gezüchteten Karzinomzelllinien der Niere ermittelt. Die kultivierten Zelllinien wurden mit
Hilfe der APAAP-Technik und der real-time PCR auf eine Expression von CRP untersucht.
Die Zelllinien blieben unstimuliert und es erfolgte jeweils ein Doppelansatz.
Unstimulierte Caki-Zellen und die Tumorzellreihen SK-RC 35, 47 und 58 zeigten eine
homogene zytoplasmatische CRP-Färbung bei der Anwendung monoklonaler anti-CRP-
Antikörper und der APAAP-Technik (Abbildung 5a,b). Sowohl Isotyp- als auch
Negativkontrolle zeigten keine Rotfärbung.
Abbildung 5(a,b): Immunhistochemische Darstellung der CRP-Synthese durch die unstimulierte
Tumorzelllinie Caki
Abb.5a Positivkontrolle Abb. 5b Isotypkontrolle
Homogene, zytoplasmatische Immunreaktion für Kontrollfärbung mittels irrelevanten
CRP in der Caki-Zelllinie (400x Vergrößerung) Isotypantikörper (400x Vergrößerung)
Um die nachgewiesene CRP-Expression der Karzinomzelllinien auch auf mRNA-Ebene zu
belegen, studierten wir alle Zelllinien mittels quantitativer real-time PCR. Native Caki-
Zellen, SK-RC 35, 47 und 58 ergaben ein klares Amplifikationssignal für die gesuchte CRP-
mRNA. Dieses lag ungefähr 3 - 5 log-Stufen unterhalb der maximal stimulierten Hep3B-
Kontrolle (s. Tabelle 2).