permeação cutânea in vitro como ferramenta auxiliar para o estudo ...

são colhidas em intervalos de tempo pré-determinados, deve garantir
condições termodinâmicas favoráveis ao fármaco. Efetua-se então a
determinação analítica da concentração do fármaco liberado (OECD, 2004
PHARMACOPEIAL FORUM, 2006). Todos estes pontos devem ser examinados,
com bastante cuidado quando os experimentos são realizados com
substâncias com limitada solubilidade em água (LÓPEZ et al., 1998).
A liberação do fármaco a partir do medicamento e a partição deste
para a membrana são verificadas pela quantificação do fármaco restante
na formulação após o intervalo total do estudo de permeação e pela
análise feita na pele após o estudo in vitro (CHIEN, 2005). A determinação da
concentração do fármaco na pele, ao final do período de exposição,
requer a remoção do excesso de formulação, seguido de extração em um
adequado solvente. Usando então uma técnica analítica sensível como
CLAE, se quantifica o fármaco extraído. A quantidade de fármaco retido nas
camadas da pele é igual à quantidade inicial menos a quantidade final de
fármaco presente (TOUITOU; MEIDAN; HORWITZ, 1998).
Vários compostos de aplicação tópica exibindo uma larga variedade
de propriedades físico-químicas e estruturas químicas foram examinados por
Reifenrath et al. (1994), quanto à penetração na pele, demonstrando a
capacidade barreira da pele total e não somente do estrato córneo e das
camadas epidémicas, para as substâncias aplicadas topicamente, e sendo
os estudos destes autores citados nos trabalhos de Touitou; Meidan e Horwitz,
(1998).
Embora estas determinações na pele total sejam fáceis e rapidamente
realizadas, elas têm a desvantagem de não fornecer dados sobre a real
localização do fármaco. A camada córnea, a camada mais externa da
pele pode ser separada do resto da epiderme + derme por processos
especiais. Desta maneira pode-se refinar os resultados, aplicando várias e
distintas extrações nas diferentes camadas de pele separadas.
A área mais externa da pele (camada córnea) que ficou exposta a
permeação, pode sofrer o processo chamado de tape-stripping, ou seja,
nela são passados fitas adesivas cujas características e número de extrações
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