permeação cutânea in vitro como ferramenta auxiliar para o estudo ...

As peles foram analisadas em todos estes tempos de coleta para todas
as formulações e nas duas quantidades de tomada de amostra (2,0g e 0,2g),
igual procedimento foi realizado também com os placebos.
Após o término do tempo de permeação cutânea estipulado,
retiraram-se as membranas do aparelho de difusão e destas, com o auxílio
de uma espátula as amostras dos cremes que sobraram, colocando-os em
recipiente contendo metanol (25mL) e sonicando em seguida segundo
descrito no item 4.3.1. Após diluição 1:10 em metanol estas soluções foram
analisadas por CLAE, obtendo-se assim os valores do cetoconazol não-retido
nas peles.
As peles foram lavadas com solução receptora (e as lavagens foram
submetidas à análise). A área da pele exposta à permeação foi delimitada,
recortada e picotada com auxílio de bisturi e lâmina e os fragmentos
recolhidos em frascos contendo metanol (25mL), e então submetidos a
sonicação em Ultra-som por 20 min.
Após este tempo os fragmentos em solução metanólica foram
triturados (Ultraturrex®) até a total dilaceração da pele. A suspensão obtida
foi novamente sonicada (30 minutos). A mistura assim obtida foi filtrada por
papel de filtro (0,45µm) para balão volumétrico de 50mL e o volume
completado com metanol. O cetoconazol foi assim determinado em todos
os filtrados obtidos, por CLAE, utilizando-se a curva analítica do cetoconazol
em metanol conforme já descrito no ítem 4.2.2. Desta maneira, determinou-
se a quantidade de cetoconazol retido nas peles para todas as formulações
e em todos os tempos de análise.
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