Dissertação Carlos Lucena de Aguiar - Centro de Pesquisas Aggeu ...

aquelas mutações não seriam relevantes para o funcionamento da vacina e decidiu ir adiante
(informação verbal). 146
“Depois, é saber se a proteína que a gente deseja realmente está sendo feita. Depois, é saber se
o sinal de tráfego molecular que a gente incluiu está realmente levando pro caminho que a
gente deseja” (informação verbal). 147
Avaliou-se, então, a expressão da construção, transfectando células 293 humanas com a
construção, para posterior detecção das proteínas por imunofluorescência. O antígeno estava
sendo expressado corretamente, e além disso foi confirmada a distribuição da proteína
fusionada a Lamp para o compartimento celular esperado (em fase de elaboração). 148 Isso
indicava que todas as regiões definidas para início, fim e fusão do antígeno com Lamp
estavam adequadas, possibilitando seu tráfego da forma desejada.
“Mas eu não sabia se funcionava. Estava pronto, estava aqui. Aí tinha que agora produzir este
DNA em larga escala para enviar para Bio-Manguinhos. E lá seria feito o ensaio em
camundongo” (informação verbal). 149
Um dos motivos de não se fazer o teste no Aggeu era pela falta de animais SPF (“Specific
Pathogen Free”). Também se necessitou pedir a JHU kits especiais para produzir a vacina em
condições adequadas para o teste, livre de endotoxinas. Além disso, havia todos os trâmites
administrativos de Bio-Manguinhos para que se pudesse realizar os testes. O protocolo dos
testes foi preparado pelo LaViTE e JHU e encaminhado a Bio-Manguinhos (informação
verbal). 150 E ao fim do ano de 2007, começavam os testes na unidade da Fiocruz do Rio, com
o total de 130 camundongos. Também seriam realizados testes paralelos em JHU, com um
número menor de animais.
“E depois disso é que a gente começou a avaliar a resposta imune. Como essa vacina se
compara a nível imunológico com o vírus atenuado 17DD? [...] Ele (o sistema imune)
146 Entrevista com o biólogo molecular.
147 Entrevista com o pesquisador médico.
148 Draft de artigo científico de autoria de Ernesto Marques e Rafael Dhalia, com o título “Development and
validation of three naked DNA-based vaccine candidates against yellow fever vírus infection”.
149 Entrevista com o biólogo molecular.
150 Entrevista com o biólogo molecular.
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