Manual de Leprologia - BVS Ministério da Saúde

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4 – Cortar em finos pedaços e triturar num gral, até obter papa
uniforme;
5 – Diluir com sôro fisiológico na proporção de 1 gr. para 20 cm 3 ;
6 – Filtrar através de uma gase quatro (4) vêzes dobrada;
7 – Adicionar ácido fênico em proporção de 0,5%.
8 – Esterilizar no autoclave;
b) Lepromina bacilar (técnica de Dharmendra)
Esta lepromina contem sòmente bacilos. É preparada da seguinte
maneira:
Itens 1, 2, 3 e 4 tais como no preparo da lepromina integral;
5 – Juntar certa quantidade de clorofórmio (de 1 a 2cm 3 ), continuar
a triturar;
6 – Retirar o clorofórmio sobrenadante (que contém os bacilos),
acrescentar outra quantidade de clorofórmio no gral; misturar
bem com pistilo; repetir esta mesma manipulação até que o
material triturado no gral fique isento de bacilos, o que se
comprova fazendo uma lâmina dêste material para exame no
microscópio;
7 – o clorofórmio contendo bacilos e também lipídios teciduais,
evapora-se em banho-maria e o resíduo é ressuspenso em éter a
fim de retirar os lipídios;
8 – Centrifugar, desprezar o sobrenadante etéreo, e secar o resíduo
constituído agora sòmente de bacilos;
9 – Suspender os bacilos em sôro fisiológico, na proporção de 1
mg de bacilos por 10 cm 3 de sôro;
10 – Adicionar fenol na proporção de 0,5% e esterilizar em
autoclave.
Tanto a lepromina integral, como a bacilar têm a propriedade de
resistir à esterilização em altas temperaturas sem perder ou mesmo
diminuir as suas qualidades. Isto significa que as substâncias responsáveis
pelo fenômeno de MITSUDA são termo-estáveis.