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eniforme, corpo amarelo e cerdas normais. CLASSE5: fêmea ( Xm/Xp/y + YB s )– não-disjunçãonomacho:olhovermelhoeembarra,corposelvageme cerdasretorcidas. CLASSE 6: macho (XM/y + Y) – perda parcial do braço longo do cromossomo Y: olho branco e em barra, corpo amarelo e cerdas retorcidas. CLASSE 7: macho (XmYB s )– perda do braço curto do cromossomo Y: olho branco e em barra, corpo amarelo e cerdas retorcidas. CLASSE 8: mosaico (Xm/yYB s – Xm/YB s ) – perda do cromossomo Y, no braço curto; lado A: olho branco e em barra, corpo selvagem e cerdas retorcidas. Lado B: olho branco e me barra, corpo amarelo e cerdas retorcidas CLASSE9: fêmea (Xm/Xm/y + YB s )– nãodisjunçãonafêmea:olhobranco eembarra,corposelvagemecerdas retorcidas CLASSE 10: fêmea (Xm/XM) – não-disjunção na fêmea: olho branco, redondo, corpo amarelo e cerdas retorcidas. CLASSE 11: macho (Xm/O) nãodisjunção na fêmea: olho vermelho e reniforme, corpo amarelo e cerdas retorcidas. Análise Estatística A análise foi feita, segundo Frei e Wrügler (1988), considerando-se as hipóteses (Ho – hipótese nula, onde se considera que não haja diferença entre o controle negativo (K-) e o tratamento e Ha – hipótese alternativa que determina que o tratamento leva a um aumento da freqüência de mutações, quando comparadas com as freqüências de mutações espontâneas), as quais permitem classificar o resultado como: positivo, negativo fraco-positivo e inconclusivo. Teste de Qui-quadrado (X 2 ) O resultado de X 2 calculado foi comparado com um valor de X 2 na tabela, com um nível de significância especificado, unilateral = 2.706 e com 0,5 (1 GL), podendo ou não aceitar Ho, dependendo do resultado. RESULTADOS O teste rápido Ring-x-loss, baseia-se na perda do cromossomo X em anel em células pós-meióticas. Com esse teste, podemos detectar eventos como: perda total do cromossomo X e/ou Y, mosaicismo e não-disjunção, ocorridos em células germinais.Machosdalinhagem“Ring x”, tratados por 24hs, com extrato da folha de Hyptidendrom canun foram cruzados com fêmeas virgens ywsn³ pela técnica de brooding (ninhada 1, 2 e 3). O extrato foi usado nas seguintes concentrações: D1- 0.004g/ml; D2-0.006g/ml e D3- 0.009g/ml em solução aquosa de sucrose a 5%. Para controle positivo foi utilizado uretano a 0.04g/ml e para controlo negativo, usou-se sucrose a 5%. A análise fenotípica da geração F1 forneceu uma porcentagem média de perda cromossômica para Hyptidendroncanun de 1.63% para dose 1; 1.78% para dose 2 e 1.89% para dose 3. Tomando-se o controle negativo como referência (2 a 4%), a análise estatística forneceu um resultado negativo, indicando que Hyptidendrom canun não provoca perda cromossômica parciais, totais ou não-disjunção em células germinativas e Drosophila melanogaster. Asfiguras 2,3e4mostram a freqüência de perda completa do cromossomo X em anel, para as ninhadas 1, 2e3,ocorridas em espermatozóides, espermátides adultas e espermátides jovens respectivamente. Não foi observado uma diferença significante entre os tratamentos. Os resultados obtidos nos permitiu concluir que o extrato da planta Hyptidendroncanun, nas referidas concentrações, não se mostrou capaz de induzir alterações mutacionais, bem como: não-disjunção, deleção ou perca cromossômica. Sendo assim, torna-se viável a utilização da planta pela população, porém, fica a necessidade da realização de novos testes em células somáticas. Discussão e Conclusão O aparecimento de algumas doenças e o alto custo dos medicamentos, tem levado a população a procurar o apoio na medicina alternativa, fazendo uso de remédios preparados com plantas medicinais, por esses serem de fácil acesso e mais econômico. Porém, a preocupação com o uso indiscriminado de certas plantas, está no fato de não conhecermos o verdadeiro potencial genotóxico, bem como a ação farmacológica de todas as espécies. Pesquisas e estudos têm mostrado que muitas substâncias extraídas de plantas medicinais podem causar danos no material genético, caracterizando-se em mutação (adição, substituição ou deleção de base no DNA). Muitos testes estão à disposição dos pesquisadores para avaliação dos efeitos genotóxicos e/ou carcinogênicos de diferentes substâncias, utilizando também diferentes organismos como: microrganismos, plantas, roedores e Drosophila. No Brasil diversas plantas já tiveram sua genotoxicidade estudada, tais como a lobeira (Carmo et al, 1997), o barbatimão (Sousa et al, 1997), a espinheira-santa, a goiabeira - vermelha (Teixeira et al, 1997), e a sucupira (Carvalho et al, 1998). Moreno et al., (1991), em estudos feitos para verificar os efeitos genotóxicos, mutagênicos e recombinogênicos do alcalóide aporfínico boldina, presente na planta medicinal Peumus boldus, através do “SOS cromoteste” e “Teste de Ames”, para linhagens TA100, TA98 e TA102, observou que, este alcalóide, não apresentouatividadegenotóxicacom ou sem ativação metabólica e não foi capaz de induzir mutações de ponto em células haplóides de S.cerevisae. A boldina também teve sua genotoxicidade testada por Tavares e Takshashi (1991), através do teste de micronúcleos “in vivo” em ratos e em teste “in vitro” com linfócitos de 132 <strong>Biotecnologia</strong> Ciência & Desenvolvimento - nº 29
sangue de pessoas saudáveis de ambos os sexos, por meio da análise citogenética. Os resultados mostraram um aumento de aberrações cromossômicas ou da freqüência de trocas de cromátides-irmãs. No presente trabalho realizado para testar a genotoxicidade de Hyptidendron canun (Pohl ex Benth) R. Harley, que é uma planta popularmente usada devido as suas propriedades medicinais, através do teste rápido “Ring-x-loss” com D. melanogaster,o Uretano funcionou como controle positivo, mostrando-se capaz de induzir perdas cromossômicas e outras alterações. O controle negativo sucrose a 5%, apresentou uma porcentagem média de perda cromossômica de 1.65% para o brood-1, 2.0% para o brood-2 e 1.30% para o brood-3. A freqüência de mutações espontâneas oscila de 2.0% a 4.3%, com uma média de 3.3%, sendo que o valor histórico do Grupo da Universidade de Leiden (Holanda) é de 25%, (Zijlstra,1988). REFERÊNCIAS Andrade HHR, Gimmler-Luz, MC & Reguly, ML (1991). 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