Untitled - Biotecnologia

este no caso do milho é reportado
junto ao núcleo agrícola de Pato Branco.
Uma das causas preocupantes no
mundo todo é o desenvolvimento fúngico
nos grãos, principalmente na lavoura
e no seu armazenamento.
Com o desenvolvimento dos fungos
podem ocorrer perdas nutricionais
devidas à transformação ou degradação
de nutrientes, consumo de energia
bruta, consumo de matéria seca. O
principal fator a considerar é a possibilidade
de espécies toxigênicas de fungos
se desenvolverem e produzirem
metabólitos tóxicos (micotoxinas) ao
homem e aos animais (LACEY, 1988).
Segundo SMITH e MOSS (1985), o
milho em geral constitui-se na principal
fonte de entrada de micotoxinas
nas dietas humanas, em particular as
aflatoxinas, zearalenona e ocratoxina
A.
A aflatoxina é uma das micotoxinas
mais conhecidas e já comprovadamente
reconhecidas como causadora de
efeitos danosos para a saúde de muitos
animais e inclusive relacionadas como
causadoras de várias perturbações da
saúde do homem (SCUSSEL, 1998):
- Efeitos carcinogênicos
- Efeitos teratogênicos
- Atividade mutagênica
- Aberrações cromossomais
- Imunorreatividade
A ocorrência mundial em micotoxinas
está dividida pelos cinco continentes,
sendo que um particular as micotoxinas
Fumonisinas que ocorrem somente
no hemisfério sul do planeta,
muitos cientistas dizem que é pelo
fatorclimático(FEEDINGTIMES,1999).
Na América do Norte ocorrem as
micotoxinas: Aflatoxinas, Vomitoxinas,
Zearalenona e Ocratoxina. Na América
Central e Sul ocorrem: Aflatoxinas,
Vomitoxinas, Fumonisinas, Ocratoxinas
e Toxina T-2.
Na Europa e Ásia ocorrem as micotoxinas:
Aflatoxinas, Vomitoxinas e
Zearalenona.
Na África ocorrem as Aflatoxinas, as
Fumonisinas e a Zearalenona.
Na Oceania ocorrem as Aflatoxinas
e as Fumonisinas.
A ocorrência descrita anteriormente
pode-se notar que uma das micotoxinas
existentes em todo o mundo são
as Aflatoxinas, os fungos produtores
FIGURA 1 – VISTA PARTE EX-
TERNA DO EQUIPAMENTO DE
CONTAGEM DE FLUORESCÊNCIA
LUMINOSA AMARELO-ESVERDEA-
DO – CFLAE
FONTE: CANCADO, 2001
FIGURA 2 – VISTA PARTE IN-
TERNA DO EQUIPAMENTO DE
CONTAGEM DE FLUORESCÊN-
CIA LUMINOSA AMARELO-ES-
VERDEADO – CFLAE
FONTE: CANCADO, 2001
FIGURA 3 – VISTA SUPERIOR
DO EQUIPAMENTO DE CONTA-
GEM DE FLUORESCÊNCIA LUMI-
NOSA AMARELO-ESVERDEADO –
CFLAE
FONTE: CANCADO, 2001
são o Aspergillus flavus eoAspergillus
parasiticus, sendo o mais comum o
primeiro.
A detecção desta micotoxina bem
como as demais são efetuados em
laboratórios e com custos altos, já que
para a avaliação e a análise são feitas
por meio de cromatografia ou por kits
de detecção, podendo utilizar a cromatografia
de camada delgada (CCD) ou
a cromatografia líquida de alta pressão
(HPLC). Os kits existentes no mercado
darão uma resposta positiva ou negativa,
ou seja, se há ou não determinada
micotoxina,efetuandoumaanálisequalitativa,
agora se o objetivo é uma
análise quantitativa, após a detecção
positiva feita pelo kit, passa-se a amostra
em um cromatógrafo líquido de alta
pressão para quantificá-la, tornando
um custo ainda mais elevado.
O objetivo deste trabalho foi comparar
a metodologia simplificada de
detecção das aflatoxinas através da
Contagem por Fluorescência com Luminosidade
Amarelo-Esverdeada
(CFLAE) em grãos de milho, com o
método oficial da AOCS (1997), detecção
por cromatografia de camada delgada
(CCD).
MATERIAL E MÉTODOS
AMOSTRAGEM
A matéria-prima utilizada na pesquisa
foi amostras de grãos de milho
integral, totalizando 144 divididas em
dois lotes de 72 amostras cada, referentes
a safra de 2000 e safra de 2001,
provenientes de diversas partes do
Estado do Paraná e cada uma contendo
cinco quilogramas, sendo embaladas
em saco de papel multifolhado com a
terceira folha impermeável.
Os locais de coleta de amostras de
grãos de milho foram de cinco regiões
do Estado do Paraná, conforme o mapa
1.
Na preparação da amostra foi utilizado
4,5 kg de grãos de milho para a
análise de aflatoxinas por CFLAE e para
a análise por CCD foi efetuado o quarteamento
manual, que consiste em
agrupar a amostra e espalhá-la sobre
uma superfície lisa em forma de retângulo
e por meio de uma tira de madeira
cortou-se em metades até adquirir a
quantidade de duas amostras de 250g
Biotecnologia Ciência & Desenvolvimento - nº 29 135