Untersuchung des genetischen Schadens in peripheren ...

Sterile Werkbank Gelair BH26, Flow Laboratories GmbH,
Meckenheim;
Elektrophorese-Kammer Instituts-Eigenbau;
Zentrifuge Hettich Universal/K2S, Hettich, Tuttlingen;
Zytozentrifuge Cytospin 3, Shandon, Astmore/GB;
Pippetten/E-Pippetten
2.2 Verwendete Zellarten
2.2.1 Maus-Lymphom-Zellen (L5178Y tk +/-, MoLy)
Diese Zelllinie (Klon 7.3.2.c) wurde von Dr. W.J. Caspary,
National Institute of Enviromental Health Sciences, Research Triangle Park,
North Carolina/USA, zur Verfügung gestellt.
2.2.2 Humane Lymphozyten
Die für die Experimente benötigten humanen Lymphozyten stammen von männlichen
und weiblichen Dialysepatienten des Dialysezentrums Würzburg.
Da eine frühere Studie des Instituts für Pharmakologie und Toxikologie Würzburg
gezeigt hat, dass im Anschluss an den Dialysevorgang entnommenes Blut einen leicht
geringeren DNA-Schaden aufweist, wurden die anschließenden Versuche immer mit
Blutproben, die vor dem Vorgang der Dialyse entnommen wurden, durchgeführt.
Außerdem wurden humane Lymphozyten zweier ständiger, gesunder Kontrollpersonen
(männlich, Nichtraucher) verwendet.
Die Abnahme erfolgte in Ammonium-Heparin-Monovetten (9 ml S-Monovetten,
Saarstedt, Nürtingen), um die Blutgerinnung zu verhindern. Die Verarbeitung geschah
unmittelbar danach, maximal innerhalb einer Stunde. Die Zeit ist bei der Arbeit mit
humanen Lymphozyten ein maßgeblicher Faktor, da diese nur einige Tage kultiviert
werden können, bevor sie absterben.
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