Untersuchung des genetischen Schadens in peripheren ...

2.2.1 Maus-Lymphom-Zellen (L5178Y tk +/-, MoLy)............................................. 21
2.2.2 Humane Lymphozyten...................................................................................... 21
2.3 Medien und Puffer für die Zellkulturen............................................................ 22
2.4 Kultur der Zellen............................................................................................... 26
2.4.1 Auftauen von Zellen......................................................................................... 26
2.4.2 Einfrieren von Zellen........................................................................................ 26
2.4.3 Kultur der Maus-Lymphom-Zellen (L5178Y tk +/-, MoLy)............................ 27
2.5 Puffer und Lösungen für den Comet-Assay...................................................... 28
2.6 Puffer und Lösungen zur Anfertigung der Mikrokernpräparate....................... 30
2.7 Durchführung der Experimente........................................................................ 31
2.7.1 Isolierung der Lymphozyten............................................................................ 31
2.7.2 Anfertigung der Zellpräparate für den Comet-Assay...................................... 32
2.7.3 Auswertung des Comet-Assay......................................................................... 33
2.7.4 Anfertigung der Zellpräparate zur Bestimmung der Mikrokernrate................ 34
2.7.5 Färbung mit Acridin-Orange............................................................................35
2.7.6 Kriterien der Auswertung der Acridin-Orange-gefärbten Präparate............... 35
2.7.7 Allgemeines zur Auswertung der Experimente .............................................. 36
3 Ergebnisse 37
3.1 Verlaufsstudie………………………………………………………………... 37
3.1.1 Untersuchtes Patienten-Kollektiv……………………………………………. 38
3.1.2 Vergleichende Darstellung von Mikrokernrate, Anzahl doppelkerniger
Lymphozyten und relativer DNA-Schaden im Verlauf……...………………. 39
3.1.2.1 Kontrollpersonen……………………………………………………………...39
3.1.2.2 Gruppe 1............................................................................................................44
3.1.2.3 Gruppe 2............................................................................................................50