Untersuchungen zur Struktur und biologischen Aktivität von ...

INHALT
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1.2.1 Die Zellwand der Mykobakterien................................................................21
1.2.1.1 Zytoplasmamembran ...........................................................................22
1.2.1.2 Mycoloyl-Arabinogalactan-Peptidoglycan-Komplex .........................24
1.2.1.3 Lipoarabinomannan und Lipomannan.................................................27
1.2.1.4 Nicht-kovalent gebundene Lipide und Glycolipide.............................29
1.2.1.5 Die Kapsel ...........................................................................................31
1.2.2 Biosynthese mykobakterieller Zellwand-Polysaccharide............................37
1.2.2.1 Biosynthese des Mycoloyl-Arabinogalactan-Peptidoglycan-
Komplexes...........................................................................................................37
1.2.2.2 Biosynthese des Lipoarabinomannans ................................................40
1.2.3 Funktion mykobakterieller Zellwand-Polysaccharide.................................41
1.2.3.1 Der Mycoloyl-Arabinogalactan-Komplex als hydrophobe Barriere...42
1.2.3.2 Die Rolle des Lipoarabinomannans im Krankheitsverlauf..................43
1.2.4 Funktion mykobakterieller Kapselpolysaccharide ......................................44
2. ZIEL DER ARBEIT..............................................................................................47
3. MATERIAL UND METHODEN.........................................................................48
3.1 MATERIAL ........................................................................................................48
3.1.1 Chemikalien und Lösungsmittel..................................................................48
3.1.2 Bakterien......................................................................................................50
3.1.3 Wachstumsbedingungen..............................................................................50
3.2 PRÄPARATIVE METHODEN................................................................................51
3.2.1 Ernten der Zellen .........................................................................................51
3.2.2 Phenol/Wasser-Extraktion...........................................................................51
3.2.3 Triton-Extraktion.........................................................................................52
3.2.4 Proteinfällung mittels Ammoniumsulfat .....................................................52
3.2.5 Proteolytischer Verdau ................................................................................53
3.2.6 Gelpermeations-Chromatographie (GPC) ...................................................53
3.2.7 Trennungen mittels Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (HPLC).54
3.2.7.1 Reverse Phase-Chromatographie.........................................................54
3.2.7.2 Anionenaustausch-Chromatographie ..................................................54
3.2.7.3 Affinitäts-Chromatographie mittels ConcanavalinA...........................55
3.2.8 Entsalzung durch Ultrafiltration ..................................................................55
II