Untersuchungen zur Struktur und biologischen Aktivität von ...

ZUSAMMENFASSUNG
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6. ZUSAMMENFASSUNG
Ziel der vorliegenden Arbeit war es, aus Mycobacterium avium, Stamm 2151 Kapselmaterial
zu extrahieren. Dabei wurde zwei verschiedene Koloniemorphotypen, die sich
hinsichtlich ihrer Pathogenität im Maus-Modell unterscheiden, verglichen. Polysaccharide
wurden aus dem Gemisch isoliert, anschließend aufgereinigt, charakterisiert
auf mögliche biologische Aktivität hin getestet.
Aus der Kapsel beider untersuchter Morphotypen wurde jeweils ein Arabinomannan
und ein Lipid-haltiges Arabinomannan isoliert, von denen ersteres aufgereinigt wurde.
Dazu wurde eine teilweise etablierte Methode optimiert. Die neutralen nicht-acylierten
Arabinomannane wurden strukturell untersucht. Chemische Analysen in Verbindung
mit massenspektrometrischen Untersuchungen und Kernresonanz-Spektroskopie führten
zu Strukturvorschlägen. Dabei wurden deutliche Strukturunterschiede zwischen den
Arabinomannanen ersichtlich. Das Polysaccharid aus dem virulenten Morphotyp weist
ein deutlich größeres Mannan und ein verkürztes Arabinan auf. Das Arabinomannan aus
dem avirulenten Kolonietyp besitzt ein größeres Arabinan als Mannan.
Biologische Aktivität der isolierten Polysaccharide wurde in vitro getestet. Nach
Stimulation humaner sowie muriner Zellen mit diesen Polysacchariden wurde die
Zytokin-Produktion hinsichtlich TNF-α, IL-10, IL-12 und INF-γ gemessen. Es zeigten
sich eindeutige Unterschiede zwischen den Arabinomannanen mit und ohne Lipidanteil.
Die mit Lipid stellen starke Induktoren für Zytokin-Produktionen dar. Die Arabinomannane
ohne Lipidanteil induzieren nur äußerst schwach eine Zytokin-Antwort.
In vitro wurde eine immunmodulatorische Eigenschaft für alle Arabinomannane nachgewiesen.
Dabei führt die Stimulation humaner Immunzellen mit diesen Arabinomannanen
zu einer Zytotoxizität gegen humane Tumor-Zellen. Es wurden keine Unterschiede
zwischen Lipid-haltigen und Lipid-freien Arabinomannanen beobachtet.
Hingegen wurden Morphotyp-spezifische Unterschiede festgestellt, wobei das Arabinomannan
aus dem virulenten Typ hinsichtlich der Immunmodulation potenter erscheint.
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