Untersuchungen zur Struktur und biologischen Aktivität von ...

ERGEBNISSE
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4.3 Isolierung von Galactansulfaten
Für Fraktion 1 aus der gelpermeations-chromatographischen Trennung (siehe
Abbildung 18) aus SmT wurde die Zuckerzusammensetzung durch eine Neutralzuckeranalyse
(siehe 3.3.4) sowie durch Methanolyse (siehe 3.3.5) bestimmt. Diese ergab ein
Verhältnis von Glucose zu Galactose wie annähernd 1:3. Ebenso wurde Galactose in
furanosidischer Form, Hexuronsäure sowie eine Pentose in geringer Menge
nachgewiesen.
Um Informationen über die Substitutionsmuster der Zuckermonomere der Polysaccharide
zu erhalten, wurde von dieser Fraktion eine Methylierungsanalyse (siehe
3.3.6) durchgeführt. Die Analyse resultierte trotz Vorhandensein von Galactose als
Hauptbestandteil lediglich in der Detektion von Glucose (Daten nicht gezeigt). Durch
Vergleich der Retentionszeiten zu entsprechenden Zucker-Resten in geeigneten
Standards, wie Glycogen und Isomaltose, war es möglich, in dieser Analyse alle
Derivate zuzuordnen. Somit wurden lediglich substituierte Glucose-Reste nachgewiesen.
Die durch die Neutralzuckerbestimmung nachgewiesene Galactose als Hauptbestandteil
dieser Fraktion lieferte keine Signale. Die mitgeführte Glycogen-Kontrolle
ergab jedoch ein positives Ergebnis mit folgenden zu erwartenden Substanzen:
4-substituierte Glucopyranose, 4,6-di-substituierte Glucopyranose und terminale
Glucose in dem Verhältnis 14:2:3. Im Vergleich zum Glycogen als Standard wurden
bezüglich der Flächen unter den Kurven in der Summe nur rund 25% der Zucker
detektiert (Daten nicht gezeigt). Diese Diskrepanz könnte durch eventuell vorhandene
anorganische Substituenten erklärt werden. Derartig substituierte Polysaccharide sind
nur unzureichend in DMSO, dem zur Methylierung eingesetzten Lösungsmittel (siehe
3.3.6), löslich und wären einer Derivatisierung somit nicht zugänglich. Sind Zucker
beispielsweise durch Phosphat- oder Sulfatgruppen in einem gewissen Maße
substituiert, ist deren Löslichkeit in DMSO drastisch herabgesetzt. Um zu klären, ob
Substitutionen durch Phosphat- oder Sulfatgruppen vorliegen, wurde zunächst eine
photometrische Mikroanalyse zur Phosphatbestimmung durchgeführt (siehe 3.3.8). Ein
Nachweis von Phosphat war für diese Fraktion eindeutig negativ (Daten nicht gezeigt).
Da kein Phosphat in der Fraktion nachgewiesen werden konnte, wurden von dieser
Substanz neben Standards Infrarot-Spektren (siehe 3.3.9) aufgenommen, um möglicherweise
durch Absorptionsbanden bei charakteristischen Wellenzahlen Hinweise auf
Sulfatsubstitutionen zu erhalten. Als Positiv-Kontrolle diente Glucose-6-Sulfat, und als
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