Untersuchungen zur Struktur und biologischen Aktivität von ...

ERGEBNISSE
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Abbildung 51: Anteile viabler und apoptotischer humaner Tumor-Zellen nach Stimulation mit
Fraktion A und B aus SmO und SmT.
Von der humanen myeloischen Leukämiezelllinie THP1 wurden jeweils 2 x 10 5 Zellen ml -1 mit 10 µg
ml -1 der Polysaccharide für 48 h bei 37°/5%CO 2 stimuliert. Als Negativ-Kontrollen dienten Zellen, die
mit Lipopolysaccharid (LPS) aus Salmonella enterica sv. Friedenau Stamm H909 (10 ng ml -1 ) bzw. mit
Caspase-Substrat (25 µl C3/7-Substrat, PROMEGA) kokultiviert wurden. Zur Messung der spontanen
Apoptose wurden unstimulierte Zellen verwendet. Als Positiv-Kontrolle wurde Staurosporin (200 nM) aus
Streptomyces staurosporeus eingesetzt. Gemessen wurde die Lichtstreuung der Zellen mittels eines
präparativen FACS.
Wiederholte Experimente zeigen, dass eine Stimulation mit den Arabinomannanen nicht
zur Apoptose von Monozyten führt (siehe Abbildung 52). Die Werte geben Hinweise
darauf, dass die Monozyten im Gegenteil geringfügig stimuliert werden. Bleiben Monozyten
in Zellkultur unstimuliert, so sterben nach spätestens 48 h ab. Werden sie jedoch
stimuliert, z.B. mit LPS, so gehen sie nicht in Apoptose, sondern sichern ihr Überleben.
Die Anteile der Zellen, die diese Endstreckenenzyme Caspase 3 und 7 exprimieren, sind
nach Stimulation mit LPS und den Arabinomannanen am geringsten.
Eine Apoptose-induzierende Wirkung kann daher für die Arabinomannane in der
eingesetzten Konzentration von 10 µg ml -1 ausgeschlossen werden. Möglicherweise
wird Apoptose von Monozyten durch höhere Konzentrationen induziert. Dies wurde
nicht weiter untersucht.
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