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Untersuchungen zur Struktur und biologischen Aktivität von ...

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ERGEBNISSE<br />

______________________________________________________________________<br />

Die Fraktionen 2 nach Sephadex-G-50 (siehe Abbildung 18) aus SmO <strong>und</strong> SmT<br />

konnten so durch Affinitäts-Chromatographie aufgetrennt werden (siehe Abbildung 23,<br />

I <strong>und</strong> II). Auf dieselbe Weise wurden zwei weitere entsprechende Fraktionen jeweils<br />

aus SmO <strong>und</strong> SmT, die nach einer erneuten Anzucht gewonnen wurden, aufgetrennt<br />

(siehe Abbildung 23, III <strong>und</strong> IV).<br />

Abbildung 23: Übersicht über die Trennungen <strong>von</strong> Fraktion 2 nach Sephadex-G-50 aus SmO (I,<br />

III) sowie aus SmT (II, IV) mittels Affinitäts-Chromatographie.<br />

Die Trennungen wurden unter Verwendung einer Lektin-Sepharose-Säule (ConA-Sepharose 4B,<br />

5 x 1 cm) an einer HPLC-Anlage bei 20-22°C durchgeführt. Lösungsmittel A: 0,1 M Natriumacetat, 0,1 M<br />

Natriumchlorid, 1 mM Magnesiumchlorid, 1 mM Manganchlorid, 1 mM Calciumchlorid, pH 6,1. Lösungsmittel<br />

B: Lösungsmittel A + 1 M Methylmannopyranosid. Bei einer Flussrate <strong>von</strong> 0,8 ml min -1 wurde<br />

folgender dreistufiger Gradient angelegt: für 40 min 100% A, für 20 min 100% B, für 60 min 100% A.<br />

Detektiert wurde die UV-Absorption bei 210 nm (--) <strong>und</strong> 280 nm (--). Das Eluat wurde in den ersten<br />

60 min fraktioniert <strong>und</strong> mit einem Volumen <strong>von</strong> 0,8 ml Fraktion -1 gesammelt.<br />

Es wurden jeweils zwei Signale sowohl bei 210 nm als auch bei 280 nm in unterschiedlichen<br />

Intensitäten detektiert. Fraktion A wurde nach dem ersten Säulenvolumen<br />

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