TiHo Bibliothek elib - Tierärztliche Hochschule Hannover

Anhang
5. Das 8. Röhrchen enthält nur die Standardverdünnung 0 pg/ml und wird als
„Blank“ (Leerwert) bezeichnet.
B: Vorbereitung Verdünnungsmittel A und Verdünnungsmittel B:
Das Verdünnungsmittel A wird für die Herstellung des Nachweisreagenz A,
welches ein biotylierter anti- CCL19-Antikörper ist, benötigt. Das
Verdünnungsmittel B wird für die Herstellung des Nachweisreagenz B
vorbereitet, welches eine an Avidin konjugierte Meerrettich- Peroxidase ist.
6 ml Assay Verdünnungsmittel A beziehungsweise Verdünnungsmittel B
(2faches Konzentrat) werden mit 6 ml destilliertem Wasser verdünnt, wodurch
das für den Reagenten A und den Reagenten B zu verwendende
Verdünnungsmittel A und Verdünnungsmittel B entsteht. Dieses darf nicht
wieder eingefroren werden.
C: Vorbereitung Nachweisreagenz A und Nachweisreagenz B:
Der biotylierter anti- CCL19-Antikörper (Nachweisreagenz A) und die an Avidin
konjugierte Meerrettich- Peroxidase (Nachweisreagenz B) werden nach
Herstellerangaben vorbereitet. Die Reagenzien müssen vor der Benutzung
kurz zentrifugiert werden.
Anschließend wird der jeweilige Reagent A oder B mit dem entsprechenden
Verdünnungsmittel 1:100 verdünnt.
D: Vorbereitung Waschlösung:
Die im ELISA Kit vorhandene 20 ml Waschlösung (30faches Konzentrat) wird
mit 580 ml destilliertem Wasser verdünnt, um 600 ml Waschlösung zu
erhalten.
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