desarrollo y validación de metodología para minimizar la ...

Nivel 3: tomar 1 ml de nivel 4 y diluir con 1 ml de agua o plasma libre
de droga.
Nivel 2: tomar 250 µl de nivel 4 y agregar 750 µl de agua o plasma libre
de droga.
Nivel 1: tomar 125 µl de nivel 4 y agregar 875 µl de agua o plasma
libre de droga.
Los calibradores así preparados corresponden a una concentración en
µg/ml de:
Droga Nivel 4 Nivel 3 Nivel 2 Nivel 1
Carbamacepina 20 10 5 2,5
Se abarca un rango de concentraciones que contenga el rango
terapéutico y se corren en el HPLC.
Se construye una curva de calibración de señal en función de
concentración. En esta curva se interpolan la señal de las muestras y
los controles y se obtiene el dato en concentración.
3.6 FRECUENCIA DE CALIBRACIÓN:
La calibración es diaria para cada corrida.
3.7 CONTROL DE CALIDAD Y CRITERIOS DE ACEPTACIÓN:
Se utilizan los controles de calidad de BIO-RAD, Lyphochek therapeutic
drug monitoring (TDM) levels 1 /2 /3 alicuotados y guardados siguiendo
las especificaciones del fabricante.
Los mismos se procesan y corren a diario en cada corrida. Se acepta
un desvío máximo de +/- 2SD para los 3 niveles de Control. Por otro
lado, se realiza un seguimiento de CCI según el procedimiento
correspondiente.
El tiempo de retención del analito se determina en cada corrida
analítica, utilizando para ello el tiempo de retención del calibrador. Este
valor es registrado, es evaluado y aceptado por personal idóneo. La
identificación tanto de controles como de muestras se acepta si la señal
se encuentra en los +/-25 segundos del tiempo de retención fijado para
esa corrida.
Si existiesen dudas respecto de la identidad del pico, se procede a la
confirmación del tiempo de retención del analito, mediante el agregado
a la muestra de estándar externo de carbamazepina en alta
concentración evitando así el efecto de dilución.
3.8 CONTROL DE CALIDAD EXTERNO:
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