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Mar-Abr - Sociedade Brasileira de Oftalmologia

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110Campos SBS, Gue<strong>de</strong>s RCA, Costa BLSA, Lima RCR, Oliveira MB, Guimarães NXINTRODUÇÃOAlevodopa, precursora da dopamina, tem sidoutilizada em estudos com crianças no intuito<strong>de</strong> melhorar a acuida<strong>de</strong> visual <strong>de</strong> olhosamblíopes, associada ao tratamento oclusivo do olho são (1-3).Tem sido <strong>de</strong>monstrado, mesmo em adultos amblíopes,que o tratamento em curto prazo com a levodopa temmelhorado a sensibilida<strong>de</strong> visual ao contraste (4) .A diminuição da concentração <strong>de</strong> dopamina, aonível da retina <strong>de</strong> animais que sofreram miopia<strong>de</strong>precativa já foi <strong>de</strong>monstrada em outros trabalhos (5-7) ,além <strong>de</strong> interferir na espessura da corói<strong>de</strong> e esclera (6) .De modo que agonistas dopaminérgicos interferem nocomprimento axial ocular do olho privado (8) .A ação neurotrófica da levodopa sobre astrócitosem cultura, parece ser in<strong>de</strong>pen<strong>de</strong>nte da produção <strong>de</strong>dopamina, ocorrendo o aumento na síntese <strong>de</strong> glutation (9) .Utilizada como uma substância mucolítica eantioxidante, a acetilcisteína, um <strong>de</strong>rivado do aminoácidonatural cisteína, também estimula a síntese do glutation,tendo um efeito neurotrófico similar ao da levodopa (10) .Não se conhece relato <strong>de</strong> efeito colateral importante,mesmo em tratamento em longo prazo, com acetilcisteína.O objetivo do presente trabalho foi investigar seocorreria alteração do peso, do tamanho ocular e da árearetiniana em ratos recém-<strong>de</strong>smamados, que tinham sidosubmetidos ao tratamento farmacológico com levodopaou acetilcisteína, sem privação visual.MÉTODOSForam utilizados 31 ratos Wistar, machos e fêmeas<strong>de</strong>smamados com 21 dias <strong>de</strong> vida, provenientes dobiotério <strong>de</strong> criação do Departamento <strong>de</strong> Nutrição(UFPE), criados em ambiente com ciclo claro-escuronormal e alimentados com a dieta comercial “Labina”(ração balanceada para ratos).Diariamente, entre 10 e 14h estes animais eramsubmetidos à gavagem, introduzindo-se uma cânula <strong>de</strong>polietileno da boca até o estômago, a fim <strong>de</strong> se administrara substância <strong>de</strong>sejada.Teve-se o cuidado <strong>de</strong> distribuir animais <strong>de</strong> umamesma ninhada entre os três grupos conforme <strong>de</strong>scrito aseguir:Levodopa: Levodopa/carbidopa na dose <strong>de</strong> 1mg <strong>de</strong>levodopa/Kg <strong>de</strong> peso 1 do animal, diluída em água <strong>de</strong>stilada,em uma concentração <strong>de</strong> 0,10mg/ml, <strong>de</strong> modo que o volumeadministrado era <strong>de</strong> 1% do peso corporal do animal.Acetilcisteína: Na dose <strong>de</strong> 15mg/Kg <strong>de</strong> peso doanimal, diluída em água <strong>de</strong>stilada, em uma concentração<strong>de</strong> 1,54mg/ml, <strong>de</strong> modo que o volume administrado(aproximadamente 1% do peso corporal) era calculado<strong>de</strong> acordo com a seguinte fórmula: peso corporal × 15 ÷1540. A dose utilizada é a dose máxima antioxidanteindicada pelo fabricante do Fluimucil ® .Água <strong>de</strong>stilada: Volume administrado era <strong>de</strong> 1%do peso corporal do animal em mililitros(ml).Com estas diluições, o volume ingerido diariamentepor cada animal não ultrapassava 1,5ml em nenhumgrupo, mesmo com a dose sendo recalculada a cadatrês dias <strong>de</strong> experimento, em relação ao ganho pon<strong>de</strong>raldos animais. Os animais foram pesados (balança MAR-TE ® - mo<strong>de</strong>lo 1001) no 21º dia <strong>de</strong> vida e a cada três dias,até o peso final no dia da enucleação, não apresentandodiferença entre os grupos (levodopa 118,24±11,90g;acetilcisteína 120,46±14,69g; água 123,46±10,05g).Após 14 dias <strong>de</strong> tratamento estes animais foramanestesiados com uma mistura <strong>de</strong> Uretana 10% +Cloralose 0,4%, intraperitonial, e <strong>de</strong>pois foram sacrificadoscom uma lesão por agulha ao nível do bulbo, causandoparada respiratória.Proce<strong>de</strong>u-se a retirada do globo ocular(enucleação), o qual em seguida tinha seus diâmetrosantero-posterior e equatorial medidos, pelo mesmo operador,com um paquímetro (MAUb ® ). Foram realizadasas medidas no maior diâmetro antero-posterior, do centroda córnea até a esclera, próximo à saída do nervoóptico e no maior diâmetro equatorial, com o cuidadopara que o globo ocular não sofresse <strong>de</strong>pressão. Apósessas medidas os globos oculares foram pesados (balançaBOSCH ® -mo<strong>de</strong>lo S 2000) e em seguida fixados por1h em uma solução <strong>de</strong> paraformal<strong>de</strong>ído 1% diluído emsalina (0,9%NaCl).Os olhos assim fixados foram mantidos em soluçãosalina sob refrigeração até serem dissecados. Realizaram-secortes radiais, a fim <strong>de</strong> esten<strong>de</strong>r a retina sobreuma lâmina gelatinizada. Estas lâminas foram banhadasem uma solução com 6g <strong>de</strong> gelatina incolor diluídaem 288ml <strong>de</strong> água <strong>de</strong>stilada e 120ml <strong>de</strong> álcool a 95%.Logo após, estas eram secadas em estufa, colocado umfundo preto sob a lâmina e embaixo <strong>de</strong>sta um papelmilimetrado (figura 1). Estas lâminas foram escaneadas(Scan TCE ® ) com uma resolução <strong>de</strong> 95dpi (pontos/imagem),a fim <strong>de</strong> que não sofressem <strong>de</strong>formações <strong>de</strong> suasimagens. Em seguida, eram medidas suas áreas em milímetroquadrado(mm 2 ) utilizando o programa ScionImage. O intervalo entre a fixação do olho e as suasmedidas variou entre 5 e 10 dias.Os procedimentos com animais foram aprovadospela Comissão <strong>de</strong> Ética em Experimentação Animal –UFPE, seguindo as normas do Colégio Brasileiro paraRev Bras Oftalmol. 2005; 64 (2): 109-112

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