Genes IX Benjamin Lewin - PortuguesBR

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450 CAPÍTULO 18 REPLICAÇÃO DE DNA
vações de que a transcrição não necessita prosseguir
pela origem; esta é efetiva a até 200 pb da origem,
podendo utilizar qualquer uma das firas de DNA como
molde in vitro. O evento transcricional é inversamente
relacionado à necessidade de superenovelamenro
in vitro, sugerindo que atue modificando a estrutura
local do ONA, assim como auxiliando na desnaruração
do DNA.
ll:lfi Eventos Comuns na Iniciação
da Replicação na Origem
Conceitos Essenciais
• O princípio geral da iniciação bacteriana revela que a
origem é reconhecida inicialmente por uma proteína
que forma um grande complexo com o DNA.
• Uma pequena região do DNA rica em A-T é desnaturada.
• DnaB liga-se ao complexo e cria a forquilha de replicação.
Outro sistema para investigação das interações na origem
é fornecido pelo t'lgo lambda. Um mapa desta
região é apresentado na FIGURA 18.30. A iniciação da
replicação na origem de lan1bda requer a "ativação" por
____
-·· . _,....,. o ri
A transcrição
deve iniciar aqui
Para a replicação
iniciar aqui
FIGURA 18.30 O início da transcrição em PRé necessário para
ativar a origem do DNA de lam bda.
meio do início da transcrição a partir de P R' Assin1 como
nos eventos que ocorrem em oriC, istó não significa
necessariamente que o RNA constima mn iniciador para
a fira contínua. Analogias enrre os sistemas sugerem
que a síntese de RNA poderia estar envolvida na promoção
de alguma alteração estrutural nesta região.
A iniciação requer os produtos dos genes O e P
do fago, assim como várias funções do hospedeiro.
A proteína O do fago liga-se à origem de lambda; a
proteína P do fago incerage com a proteína O e
com as proteínas bacrerianas. A origem situa-se no
interior do gene O, de modo que a proteína atua
próximo a seu sítio de síntese.
Variantes do fago- denominados 'Adv- consistem
em genornas mais curtos, que carreiam toda a
informação necessária para a replicação, porém são
desprovidos de funções infectantes. O DNA de Mv
sobrevive na bactéria como um plasmídeo, podendo
ser replicado in vitro por um sistema consistindo
nas proteínas O e P, codificadas pelo fago, juntamente
com as funções de replicação bacreriana.
As proteínas O e P de lambda formam um complexo
em conjunto com DnaB na origem de lambda,
oriÀ.. A origem consiste em duas regiões, conforme
ilustrado na FlGUAA 18.31: uma região compreendendo
mna série de quatro sítios de ligação para a proteína
O, adjacente a uma ~egião rica em & T
O primeiro estágio da iniciação consiste na ligação
de O, originando tuna estrutura relativamente esférica,
com diâmetro de ~ 11 nm, estruttua esta às ve-tes denominada
0-ssomo. O 0-ssomo contém ~ 100 pb ou 60
kDa de DNA. Existem quatro sítios de ligação de 18
pb para a proteína O, a qual possui ~34 kDa. Cada
sítio é palindrômico e, provavelmente, se liga a um dimero
simétrico de O. As seqüências de DNA dos sítios
O DNA é desnaturado
I
FlGURA 18.31 A origem de replicação de lambda compreende duas regiões. Os eventos
iniciais são catalisados pela proteína O, a qual se liga a uma série ée quatro sítios e,
em seguida, o DNA da região adjacente, rica em A-T, é desnaturado. O ONA está ilustrado
como um duplex reto; porém este, na realidade, dobra-se na origem.