Genes IX Benjamin Lewin - PortuguesBR

26.8 CINCO snRNPS FORMAM O SPUCEOSSOMO 679
cias externas ao íntron. Este processo é denominado
definição de íntron.
Em um caso extremo, as proteínas SR podem
ligar-se in 11itro na ausência de U 1, levantando a
possibilidade da existência de uma via de splicing
independente de U 1.
Uma rota alternativa de formação do spliceossomo
pode ser acompanhada quando os íntrons são
longos e os sítios de splicing são fracos. Conforme
ilustrado à direita na figura, o sftio de splicing 5' é
reconhecido pelo snRNA Ul da forma convencional.
Contudo, o sítio de splicing 3' é reconhecido
como parte de um complexo formado ao longo do
éxon seguinte, no qual o sírio de splicing 5' está também
ligado pelo snRNA Ul. Esre snRNA UI está
conectado à U2AF no rraco de pirimidinas pelas
proteínas SR. Quando a snRNP U2 se associa para
gerar o complexo A, há um rearranjo no qual o
sírio de splicing 5' correco (aquele mais à esquerda)
desloca o sírio de splicing 5' a jusante no complexo.
O aspecto importante desta rota de splicing é o faro
desta requerer seqüências localizadas a jusante ao
próprio ínrron. Em geral, tais seqüências incluem
o sítio de splicing 5' seguinte. Este processo é denominado
definição de éxon. Este mecanismo não
é universal: nem as proteínas SR, nem a definição
de éxon são encontradas em S. cerevisiae.
Sírios de splicing3' "fracos" não se ligam de forma
eficiente à U2AF e à snRNP U2. Seqüências adicionais
são necessárias para haver a ligação das proteínas
SR, auxiliando a ligação de U2AF ao segmento de
pirimidinas. Tais seqüências são denominadas "intensificadores
de splicing', sendo encontradas mais comumente
no éxon a jusante ao sítio de splicing 3'.
13:1 Cinco snRNPs Formam o
Spb'ceossomo
' Conceitos Essenciais
• A ligação das snRNPs U5 e U4/U6 convertem o complexo
A no spliceossomo Bl, que contém todos os componentes
necessários ao splicing.
• O spliceossomo passa através de uma série de complexos
adicionais à medida que o sp/icing ocorre.
• A liberação da snRNP Ul permite que o snRNA U6 interaja
com o sítio de sp/icing 5', convertendo o spliceossomo
Bl em spliceossomo B2.
• Quando U4 se dissocia da snRNP U6, o snRNA U6 pode
parear com o sn RNA U2, formando o sítio catalítico ativo.
Após a formação do complexo E, as outras snRNPs e
fatores envolvidos no splicing associam-se ao complexo
em uma ordem definida: A FIGURA 26.13 mostra
os componentes dos complexos, os quais podem ser
idenrificados à medida que a reação prossegue.
O complexo B 1 é formado quando um rrímero,
comendo as snRNPs U5 e U4/U6, liga-se ao complexo
A contendo as snRNPs U 1 e U2. Este complexo é
considerado um spliceossomo porque possui os componentes
necessários à reação de splicing. Este é convertido
no complexo B2 após a liberação de Ul. A
dissociação de Ul é necessária para permitir que os
outros componentes se justaponham ao sítio de spiicing
5', especialmente o snRNA UG. Neste momento,
o snRNA U 5 muda sua posição; inicialmente, este
encontra-se próximo às seqüências do éxon no sítio
de splicing 5 ', deslocando-se, então, para as proximidades
das seqüências do íntron.
ASF
H
/SF2 '--Q / U1 SF 1
C
G
-
,/"'/BBP
tJAAC Ry AG-= Complexo E
~ "u2
c~ CompfO>oA
AGtJAAC P-y AG = U2 liga-se ao sítio de ramificação
~
~fU5 U6
•
c:G / U2AF ComplexoB1
- / O trímero U5/U41U61iga-se
U51iga-se ao éxon, no sítio 5'
UAAC P..y. A G -===:. U6 liga-se a U2
I"()' a~~
~ACUAAC
Complexo 82
U1 é liberado
U5 desloca-se do éxon para o intron
Py AG = U6 liga-se no sítio de splícing 5'
c:
~ J O ATP é hidrolisado
Complexo C1
U ~ U4 é liberado
G 'I U6/U2 catalisa a transesterificação
UAAC Py AG U5 liga-se ao éxon, no sitio de splicing 3'
O sítio 5' é clívado e o laço é formado
c;)
~ O ATP é hidrolisado
c::::_~
eu
~
ComplexoC2
U2/U5/U6 permanecem lígados ao laço
O sftio 3' é clivado e os éxons são ligados
O ANA processado é ligado
O laço é linearizado
FIGURA 26.13 A reação de splicing ocorre por intermédio de estágios distintos, nos
quais a formação do spliceossomo envolve a interação de componentes que reconhecem
seqüências consenso.