Genes IX Benjamin Lewin - PortuguesBR

26.19 AS EXTREMIDADES 3' DOS mRNAs SÃO GERADAS POR CLIVAGEM E POLIADENILAÇÃO 695
Como a reação de terminação ocorre? Esta não
pode ser baseada na instabilidade da região rU-dA do
híbrido RNA-DNA simada na extremidade do transcrito,
pois, freqüentemente, apenas os dois primeiros
resíduos de U são transcritos. Talvez a região rica em
G-C desempenhe o papel de tornar a enzima mais
lenta, embora pareça não haver qualquer equivalente
ao grampo envolvido na terminação procariótica. Permanecemos
ainda intrigados quanto à questão de
como a emima pode responder de forma tão espedfica
a um sinal tão curto. Contrariamente à reação de
iniciação, na qual a RNA polimerase IIl é incapaz de
realizar por si só, a terminaç,'io parece ser urna atividade
da própria enzima.
t.tiijl As Extremidades 3' dos
m R NAs São Geradas por
Clivagem e Po~iadenilação
Conceitos Essenciais
• A seqüência AAUAAA é um sinal de clivagem para gerar
uma extremidade 3' de um mRNA que é poliadenilado.
• A reação requer um complexo protéico contendo um
fator de especificidade, uma endonuclease e uma poli(A)
polimerase.
• O fator de especificidade e a endonuclease clivam o
RNA a jusante ao AAUAAA.
• O fator de especificidade e a poli(A) polimerase adiei·
onam progressivamente cerca de 200 reslduos A à extremidade
3'.
• Seqüências ricas em A-U na cauda 3' controlam a poliadenilação
ou desadenilação durante o desenvolvimento
embrionário de Xenopus.
As extremidades 3' dos mRNAs são geradas por
uma clivagem seguida da poliadenilação. A adição
de poli(A) ao RNA nuclear pode ser impedida pelo
análogo 3 '-desoxiadenosina, também conhecido
como cordicepina. Embora a cordicepina não interrompa
a transcrição do RNA nuclear, sua adição
impede o aparecimento do mRNA no cicoplasma.
Isto indica que a poliadenilação é necessdria à maturação
do mRNA a partir do RNA nuclear.
A geração da extremidade 3' é ilustrada na FI-
UR \ 26.34. A RNA polimerase transcreve além do
sítio que corresponde à extremidade 3 ', havendo
seqüências no RNA que são reconhecidas como alvo
de uma clivagem endonucleolítica, seguida da poliadenilação.
Um único complexo de processamento
realiza mmo a clivagem como a poliadenilação.
A poliadenilação estabiliza o mRNA contra a degradação
a partir da extremidade 3' . Sua extremidade
5' já encontra-se estabilizada pelo cap. A RNA
polimerase continua a transcrição após a clivagem,
mas a extremidade 5' gerada pela d i vagem encontra-se
desprotegida.
O evento de clivagem corresponde a um faror desencadeador
indiretO de terminação pela RNA poli- .
merase li. Uma exonudease liga-se à extremidade 5'
do RNA que esrá sendo ainda transcrito após a divagem.
A enzima degrada oRNA com uma velocidade
superior à de sua síntese, de modo que alcança a polimerase.
A enzima enrão imerage com proteínas auxiliares
que se encontram ligadas ao domínio carbóx.iterminal
da polimerase, desencadeando a liberação da
RNA polimerase do DNA e promovendo a terminação
da transcrição. O modelo global é similar àquele
descrito para rho, na terminação da transcrição pela
RNA polimerase bacteriana (ver Seção 11.22, Como
o Fator Rho Atua?). Isto explica porque os sítios de
terminação da RNA polimerase II não são bem definidos,
podendo ocorrer em vários locais no interior
de uma longa região a jusanre ao sítio que corresponde
à extremidade 3' do RNA.
Uma propriedade comum dos mRNAs de eucariotos
superiores (mas não de leveduras) corresponde
à presença de uma seqüência MUAAA altamente
conservada na região de 1 I a 30 nudeotídeos a montante
ao sítio de adição do poli(A). A deleção ou mutação
do hexâmero MUAAA impede a geração da
extremidade 3' pol iaden ilada. O sinal é necessário tanto
à divagem quantO à poliadenilação.
O desenvolvimento de um sistema no qual a poliadenilação
ocorre in vitro abriu uma via para a análise
das reações. A formação e funções do complexo que
realiza o processamento 3' estão ilustradas na f!GUP
26.35. A geração da estruUifa terminal 3' adequada
,..
,
5' cap
5 ' cap ~ lf\
Elongação
~
Exonuclease
\ c.
hvagem
~
Endonuclease
Degradação
Poliadenilação
I ~ A
AAUAAA v · An
RGURA 26.34 A seqüência AAUAAA é necessária à clivagem,
para gerar uma extremidade 3' para a poliadenilação.