Genes IX Benjamin Lewin - PortuguesBR

294 CAPÍTULO 11 TRANSCRIÇÃO
J
Fatores de terminação e antiterminação ligam-se à RNA polimerase
Promotor Sítio nut Terminador
boxA
boxB
CGCTCTTANNNNNNNNNAGCCCTGAAPuAAGGGCA
GCGAGAATNNNNNNNNNTCGGGACTTPyTTCCCGT
~ Q NusA
NusB-S10
liga-se
ao boxA
NusG
facilita a
montagem
do complexo
pN
liga-se
ao boxB
Fator geral
de terminação
FIGURA lUiS Fatores auxiliares ligam-se à RNA polimerase à medida que esta
ultrapassa determinados sítios. O sítio nut consiste em duas seqüências. NusB-510
une-se à enzima cerne à medida que esta ultrapassa o boxA. Em seguida, as proteínas
NusA e pN ligam-se à medida que a polimerase ultrapassa o boxB. A presença de
pN permite que a enzima leia alêm do terminador. produzindo um mRNA composto,
contendo seqüências precoces imediatas unidas a seqüências precoces atrasadas.
Os lócus nus codificam proteínas que fazem parte
do aparato de transcrição, mas que não são isoladas
com a enzima RNA polimerase. A função de nusA,
nusB c nttsG está relacionada apenas com a terminação
da rranscriç.'lo. nusE codifica a proteína ribossomal
S 1 O; a relaç.'lo entre sua localização na subunidade
30$ e sua fimção na terminação não está clara. As
proteínas Nus ligam-se à RNA polimerase no sítio
nttt, como apresentado na FIGURA 11.55.
NusA é um faror geral de tranScrição que aumenta
a eficiência de terminação, provavelmente intensificando
a tendência da RNA polimcrase realizar pausas
nos terminadores (e, certamente, em o urras regiões
de estrurura secundária; ver a seguir). NusB e S lO formam
um dímero que se liga especificamente ao RNA
contendo uma seqüência boxA. NusG pode estar envolvida
na montagem geral de todos os fatores Nus
em um complexo com a RNA polimerase.
Terminadores intrínsecos e dependentes de rho
exibem necessidades diferentes pelos fatores Nus.
NusA é necessário à terminação em terminadores
intrínsecos, e a reação pode ser impedida por pN.
Em terminadores dependentes de rho, rodas as quatro
proteínas N us são exigidas e, novamente, pN
isoladamente pode inibir a reação. A característica
comum de pN em ambos os terminadores é impedir
o papel de N usA na terminação. A ligação de
pN a N usA inibe a capacidade de NusA ligar-se ao
RNA, o que é necessário à terminação.
A anrirerminação ocorre nos operons 1·rn (rRNA)
de E cofi e envolve as mesmas funções de nus. l\.s regiões
líder dos operons rrn contêm seqüências boxA;
dímeros de NusB-Sl O reconhecem essas seqüências e
ligam-se à RNA polimerase à medida que este donga
além do boxA. Isso muda as propried~des da RNA
polimerase de r.al forma que esta é agora capaz de ler
além de terminadores dependentes de rho presentes
no interior da unidade de rranscriç.'io.
A seqüência boxA do RNA de lambda não se liga a
NusB-S 1 O, sendo provavelmente capacitada para realizar
isso pela presença de NusA e pN; a seqüência
boxE pode ser necessária para estabilizar a reação. Assim,
variações na seqüência boxA podem determinar
qual conjunto particular de fatores é necessário para a
anrirerminação. A~ conseqüências são as mesmas:
quando a RNA polimerase ultrapassa o sírio nut, é
modificada pela adição de fatores apropriados, sendo
incapaz de terminar quando subseqüentemente encontra
sírios terminadores.
A amirerminação em lambda requer que pN se
ligue à RNA polimerase de uma maneira que depende
da seqüência da unidade de transcrição. Esraria
pN reconhecendo o sírio boxB no DNA, ou
no transcrito de RNA? Esta não se liga independentemente
a ambos os tipos de seqüência, ligando-se
a um complexo de transcrição quando a enzima
cerne ultrapassa o sírio boxE. pN possui domínios
distintos que reconhecem a seqüência boxE
no RNA e a protefna NusA. Após unir-se ao complexo
de transcrição, pN permanece associada à enzima
cerne, tornando-se, de faro, uma subunidade
adicional cuja presença modifica o reconhecimentO
dos terminadores. ProvFelmente, pN continua,
de faro, a ligar-se a ambos, à seqüência boxE no
RNA e à RNA polimerase, que mantém uma alça
no RNA; assim, o papel do boxB no RNA seria,
parcialmente, de ancorar pN nas adjacências, aumentando
efetivamente sua concentração local.
pQ, que impede a terminação posteriormente
na infecção fágica por sua ação em qut, apresenta
um mecanismo de ação diferente. A seqüência qut
localiza-se no começo da unidade de transcrição tardia.
A porção a montante de qut sirua-se no interior
do promotor, ao passo a porção a jusante se si rua no
começo da região transcrita. Isso in1plica que a ação
de pQ envolve o reconhecimento do DNA; isto também
implica que seu mecanismo de ação, pelo menos
no que concerne à ligação inicial ao complexo, deve
ser diferente daquele de p~. pQ interage com a holoenzima
dmanre a fase de iniciação. De faro, cr7° é
necessário para a interação com pQ. Isso reforça a
visão da RNA polimerase como uma estrutura interativa
na qual alterações conformacionais induzidas
em urna fase podem afetar sua atividade em
uma fase posterior.
. A ação básica de pQ é de interferir com as pausas.
Uma vez que o pQ aruou sobre a RNA poli merase,
a enzima exilx uma grande redução nas pau-