Genes IX Benjamin Lewin - PortuguesBR

700 CAPÍTULO 26 SPLICING E PROCESSAMENTO OE RNA
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5' snoRNA BoxH BoxACA
FIGURA 26.41 Os snoRNAs H/ACA possuem duas seqüências
conservadas curtas e duas estruturas em grampo, cada uma
aprese ntando regiões da haste complementares ao rRNA. A pseudo-uridina
é formada pela conversão de uma uridina não pareada,
situada no interior da região complementar do rRNA.
qüência parcialníente conservada (box H), sicuada
entre duas estruturas em haste-alça com grampo.
Cada um desses snoRNAs apresenta uma seqüência
complemenrar ao rRNA no imerior da haste de
cada grampo. A FIGU~A 26.41 mostra a estrutura
que seria produzida pelo pareamemo com o rRNA.
No interior de cada região pareada existem duas
b:1_ses não pareadas, uma das quais COlTesponde a
uma uridina, que é convertida em pseudo-uridina.
Os snoRNAs H/ACA associam-se a uma proteína
nucleolar denominada Garl p, a qual é requerida
para a formação de pseudo-uridina, mas cuja
função é desconhecida. As pseudo-uridinas sintases
conhecidas são proteínas que não requerem um
RNA co-fator para atuar. As sinrases que poderiam
estar envolvidas na síntese de pseudo-uridina mediada
por snoRNAs não foram ainda identificadas.
O envolvimento do snRNA U7 na geração da
extremidade 3 ', e o papel dos snoRNAs no processamento
e na modificação dos rRNAs são consistentes
com a idéia que desenvolvemos no Capículo
27, RNA Caralírico, de que muitos - talvez rodos
- os evenros de processamento do RNA dependam
de interações RNA-RNA. Assim como nas reações
de spiícíng, o snRNA provavelmente atue na forma
de uma partícula ribonudeoprotéica, contendo proteínas
e também RNA. O pareamento do RNA da
partícula éom uma curta seqüência no RNA substrato
é comum (embora não seja o único mecanismo
de ação).
t.lt.li Resumo
O splicíng realiza a remoção dos íntrons e a união
dos éxons, originando a seqüência madura de RNA.
Existem pelo menos quatro tipos de reação, as quais
são diferenciadas por suas necessidades in vitro e
pelos intermediários que geram. Os sistemas incluem
os íntrons nucleares eucarióticos, os íntrons
do grupo I e do grupo II e os ínrrons do rRNA.
Cada reação envolve uma alteração na organização
no interior de uma molécula de RNA, sendo, portanto,
um evento que age em eis.
O splicíng do pré-mRNA segue vias preferenciais,
porém não obrigatórias. Somente seqüências
consenso muito curtas são necessárias; o restante
do íntron parece ser irrelevante. Todos os sítios de
splicíng 5' são provavelmente equivalentes, assim
como rodos os sírios de splicing 3'. As seqüências
necessárias são determinadas pela regra GU-AG,
que descreve as extremidades do íntron. O sítio de
ramificação UACUAAC de levedura, ou uma seqüência
consenso menos conservada em íntrons de
mamíferos, é também requerida. A reação com o
sítio de splicing 5' envolve a formação de um laço,
que liga a extremidade GU do íntron, por meio de
uma ligação 5 '-2 ', ao A na posição 6 do sítio de
ramificação. A extremidade 3 '-OH do éxon então
ataca o sítio de splicing 3 ', de forma que os éxons
são ligados e o íntron é liberado como um laço. As
duas reações correspondetn a rransesteriflcações, nas
quais as ligações são conservadas. Vários estágios
da reação requerem a hidrólise de ATP, provavelmente
para promover alterações conformacionais
no RNA e/ou componentes protéicos. A formação
do laço é responsável pela escolha do sírio de splicing
3'. Padrões de splicíng alternativo são gerados
por fatores protéicos que estimulam o uso de um
novo sírio, ou bloqueiam o uso do sírio-padrão.
O splicíng do pré-mRNA requer a formação de
um spliceossomo - uma grande partícula que organiza
as seqüências consenso em uma conformação
reativa. Freqüentemente, o spliceossomo é formado
pelo processo de definição de íntron, que envolve o
reconhecimento do sítio de spliâng 5 ', do sítio de
ramificação e do sítio de splicing 3 ' . Uma via alternativa
envolve a definição de éxon, a qual depende
do reconhecimento inicial dos sítios de spliáng 5'
de ambos, ínrron substrato e ínrron seguinte. Sua
formação ocorre por meio de uma série de estágios,
desde o complexo E (de comprometimento), que
contém a snRNP Ul e fatores de splicing, até os
complexos A e B, quando componentes adicionais
são incorporados.
O splíceossomo contém as snRNPs UI, U2, U4/
UG e U5, assim como alguns fatores adicionais de