Estudo do polimorfismo do sistema sangüíneo Diego em

Resultados
reconhece o sítio de restrição da mutação. A ação da enzima, diante do polimorfismo
nesta posição cliva o produto de amplificação do exon 14 gerando 2 bandas de 190 e 83
pb, quando revelado em gel de agarose a 2%, após corrida eletroforética. Na ausência
do polimorfismo o sítio de restrição é abolido, portanto, ocorrerá uma banda única de
273 pb. As amostras N074, N127, B050 e B070 foram submetidas à clivagem da
enzima, após amplificação, por PCR, do exon 14. Em todas as amostras a presença da
referida mutação em heterozigose foi confirmada, portanto, ocorreram três bandas de
273, 190, 83 pb, após corrida eletroforética (Figura 38).
Figura 38: Fotografia do gel de agarose referente ao produto amplificado por
PCR do exon 14 do gene SLC4A1, após digestão com enzima Apo 1,
demonstrando 3 bandas que caracterizam o status heterozigótico da mutação. Os
números identificam as amostras e as letras N e B referem-se a negros e brancos,
respectivamente.
6.4.2- Banda Memphis (Alelo G166)
70 127 50 70
N N B B
273 pb
190 pb
83 pb
Nas amostras com os genótipos DI A/DI A e DI A/DI B, foi realizada a
pesquisada do alelo 166 G (banda Memphis) através da realização da técnica de PCR-
RFLP utilizando-se a enzima Mnl 1. O alelo gera o sítio de restrição, na seqüência
complementar do codon 56 GAG, o qual é reconhecido pela enzima formando duas
bandas de 57 e 27 pb. A análise dos fragmentos obtidos com a digestão enzimática foi
realizada, após corrida eletroforética em gel de agarose a 4%. Na ausência do
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