Untersuchungen zum Argininstoffwechsel bei Mycobacterium bovis ...

Inhaltsverzeichnis
Inhaltsverzeichnis I
Abkürzungsverzeichnis V
1. Einleitung 1
2. Literaturübersicht 3
2.1. Mykobakterien .............................................................................................................3
2.1.1. Taxonomie und allgemeine Eigenschaften.............................................................3
2.1.2. Vorkommen ............................................................................................................5
2.2. Tuberkulose bei Menschen ........................................................................................5
2.2.1. Epidemiologie und Bedeutung ...............................................................................5
2.2.2. Ätiologie und Pathogenese ....................................................................................7
2.2.3. Klinik.......................................................................................................................8
2.2.4. Diagnose ................................................................................................................9
2.2.5. Therapie ...............................................................................................................12
2.2.6. Impfung ................................................................................................................13
2.3. Tuberkulose bei Tieren .............................................................................................15
2.4. Argininstoffwechsel bei Bakterien...........................................................................17
2.4.1. Der Arginindeiminase-Weg...................................................................................17
2.4.2. Andere Formen des Argininkatabolismus.............................................................19
2.5. Zielsetzung der Arbeit...............................................................................................20
3. Material und Methoden 21
3.1. Material.......................................................................................................................21
3.1.1. Bakterien und Plasmide........................................................................................21
3.1.2. Lösungen und Puffer ............................................................................................22
3.2. Methoden ...................................................................................................................26
3.2.1. Anzucht von Bakterien .........................................................................................26
3.2.2. Präparation von Plasmid-DNA..............................................................................26
3.2.3. Präparation genomischer DNA aus Mykobakterien..............................................27
3.2.4. Spaltung von DNA mit Restriktionsenzymen........................................................28
3.2.5. Agarose-Gel-Elektrophorese................................................................................28
3.2.6. Transformation von M. bovis BCG und M. tuberculosis .......................................29
3.2.7. Polymerase-Ketten-Reaktion ...............................................................................29
3.2.8. Southern Blot-Analyse..........................................................................................30
3.2.9. Kultivierung der Mykobakterien unter aeroben Bedingungen...............................32
3.2.9.1. Kultivierung in 7H9-Medium ..........................................................................32
3.2.9.2. Überprüfung auf Arginin-Assimilation ............................................................32
3.2.10. Kultivierung der Mykobakterien unter anaeroben Bedingungen.........................32
3.2.10.1. Überprüfung auf Arginin-Assimilation ..........................................................32
3.2.10.2. Überprüfung auf Ammoniak-Akkumulation..................................................33
3.2.10.3. Überprüfung auf Nitratreduktion ..................................................................33
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