1 - EUR-Lex

L 225/166 21.8.2001
Journal officiel des Communautés européennes
FR
Il importe de reconnaître qu'une conception qui est optimale (qui tire le meilleur parti des ressources)
lorsqu'on utilise une certaine méthode d'analyse statistique ne l'est pas nécessairement avec une autre méthode.
La conception recommandée pour l'estimation d'une CMEO/CSEO ne sera donc pas identique à celle recommandée
pour une analyse par régression.
Dans la plupart des cas, l'analyse par régression est préférable à l'analyse de la variance, pour des raisons exposées
par Stephan et Rogers (9) Cependant, si on ne trouve aucun modèle de régression adéquat (r 2 < 0,9), il
faut recourir à la CSEO/CMEO.
1.7.1. Conception pour l'analyse par régression
Les considérations importantes pour la conception d'un essai à analyser par régression sont les suivantes:
a) La concentration avec effet (par exemple, CE 10,20,30) et la gamme de concentrations dans laquelle la substance
d'essai produit un effet intéressant doivent nécessairement être couvertes par les concentrations
incluses dans l'essai. La précision avec laquelle les concentrations produisant un effet peuvent être estimées
sera la meilleure lorsque la concentration avec effet se trouve au milieu de la plage des concentrations testées.
Un essai préliminaire de détermination de l'ordre de grandeur peut s'avérer utile pour sélectionner les
concentrations d'essai appropriées.
b) Pour satisfaire les conditions de la modélisation statistique, l'essai doit comporter au moins un récipient
témoin et cinq autres à différentes concentrations. Le cas échéant, lorsqu'on utilise un agent solubilisant, il
faudrait étudier un groupe témoin contenant l'agent solubilisant à la concentration d'essai la plus élevée
en plus des groupes d'essai (voir paragraphes 1.8.3 et 1.8.4).
c) Une série géométrique ou logarithmique appropriée (10) (voir appendice 3) peut être utilisée. Un espacement
logarithmique entre les concentrations d'essai est préférable.
d) Si on dispose de plus de six récipients, les récipients supplémentaires devraient servir de répliques ou être
répartis dans la gamme des concentrations de manière à diminuer l'espacement entre les concentrations.
Ces deux mesures sont aussi valables l'une que l'autre.
1.7.2. Conception pour l'estimation de la CSEO/CMEO à l'aide de l'analyse de la variance
Il serait préférable d'avoir plusieurs récipients répliques pour chaque concentration, et d'effectuer l'analyse statistique
au niveau du récipient (11). Sans récipients répliques, il est impossible de prendre en compte la variabilité
entre les récipients en plus de celle qui existe d'un poisson à l'autre. L'expérience a cependant montré
(12) que la variabilité entre les récipients était très inférieure à celle qui existe au sein de chaque récipient (autrement
dit, entre les poissons) dans le cas examiné. C'est pourquoi une alternative relativement acceptable
consiste à effectuer l'analyse statistique au niveau de chaque poisson.
On doit normalement utiliser au moins cinq concentrations d'essai selon une série géométrique obéissant à un
facteur qui ne dépasse pas de préférence 3.2.
Généralement, lorsque les essais sont conduits dans des récipients répliques, le nombre de récipients témoins
répliques, et par conséquent le nombre de poissons, devrait être le double du nombre choisi à chaque concentration
d'essai, qui devrait être toujours le même (13) (14) (15). A contrario, sans récipients répliques, le
nombre de poissons dans le groupe témoin devrait être le même que dans chaque concentration d'essai.
Si l'analyse de la variance est conduite au niveau des récipients plutôt qu'à celui des poissons [ce qui exigerait
un marquage individuel des poissons ou l'utilisation de taux de croissance «pseudo-spécifiques» (voir paragraphe
2.1.2)], il faut un nombre suffisant de récipients répliques pour pouvoir déterminer l'écart-type entre
les «récipients de même concentration». Ce qui signifie que l'erreur dans l'analyse de la variance ait au moins 5
degrés de liberté (11). Si seuls les témoins ont des répliques, la variabilité de l'erreur risque d'être faussée
puisqu'elle pourrait s'accroître avec la valeur moyenne du taux de croissance en question. Comme le taux de
croissance a des chances de diminuer lorsque la concentration augmente, on aura tendance à surestimer la
variabilité.
1.8. MODE OPÉRATOIRE
1.8.1. Sélection et pesée des poissons d'essai
Il importe que le poids des poissons varie le moins possible au début de l'essai. On trouvera à l'appendice 1
les gammes de poids qui conviennent aux différentes espèces recommandées pour cet essai. Idéalement, au
début de l'essai, la gamme des poids de l'ensemble du lot de poissons utilisés dans l'essai devrait rester com-