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21.8.2001 L 225/255<br />

Journal officiel des Communautés européennes<br />

FR<br />

APPENDICE 1<br />

PRÉPARATION DE MILIEUX ELENDT M7 ET M4 ENTIÈREMENT DÉFINIS<br />

Acclimatation aux milieux Elendt M7 et M4<br />

Certains laboratoires ont éprouvé des difficultés à transférer directement les Daphnia dans les milieux M4 (1) et M7. Ils<br />

ont toutefois obtenu certains résultats en procédant à une acclimatation progressive, c'est-à-dire en transférant les animaux<br />

de leur milieu vers un milieu à 30 % d'Elendt, puis à 60 % d'Elendt et enfin à 100 % d'Elendt. La période d'acclimatation<br />

peut prendre jusqu'à un mois.<br />

PRÉPARATION<br />

Éléments en traces<br />

Différentes solutions mères (I), contenant chacune une seule substance en traces, sont tout d'abord préparées avec une<br />

eau d'une pureté adéquate, par exemple de l'eau désionisée, distillée ou obtenue par osmose inverse. À partir de ces différentes<br />

solutions mères (I), on prépare une deuxième solution mère unique (II) renfermant toutes les substances en<br />

traces (solution combinée), à savoir:<br />

Solutions mères I<br />

(substance unique)<br />

Quantité ajoutée à<br />

l'eau<br />

(mg/l)<br />

Concentration<br />

(par rapport<br />

au milieu M4)<br />

(fois)<br />

Pour préparer la solution mère combinée II,<br />

ajouter la quantité suivante de solution<br />

mère I à l'eau<br />

(ml/l)<br />

M4 M7<br />

H 3BO 3 57 190 20 000 1,0 0,25<br />

MnCl 2 *4H 2O 7 210 20 000 1,0 0,25<br />

LiCl 6 120 20 000 1,0 0,25<br />

RbCl 1 420 20 000 1,0 0,25<br />

SrCl 2 *6H 2O 3 040 20 000 1,0 0,25<br />

NaBr 320 20 000 1,0 0,25<br />

Na 2MoO 4 *2H 2O 1 260 20 000 1,0 0,25<br />

CuCl 2 *2H 2O 335 20 000 1,0 0,25<br />

ZnCl 2 260 20 000 1,0 1,0<br />

CoCl 2 *6H 2O 200 20 000 1,0 1,0<br />

KI 65 20 000 1,0 1,0<br />

Na 2SeO 3 43,8 20 000 1,0 1,0<br />

NH 4VO 3 11,5 20 000 1,0 1,0<br />

Na 2EDTA * 2 H 2O 5 000 2 000 – –<br />

FeSO 4 *7H 2O 1 991 2 000 – –<br />

Les solutions de Na 2EDTA et de FeSO 4 sont préparées séparément, puis mélangées et immédiatement autoclavées. Cela<br />

donne:<br />

Solution 21 Fe-EDTA 1 000 20,0 5,0

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