1 - EUR-Lex

L 225/286 21.8.2001
Journal officiel des Communautés européennes
FR
ce jour. On reconnaît qu'il est difficile d'obtenir des données fiables à partir d'études sur l'incidence des mutations
dans des populations humaines ou sur les augmentations possibles de leurs fréquences.
Catégorie 2
Pour classer une substance dans la catégorie 2, il faut détenir des résultats positifs tirés d'études montrant: a)
des effets mutagènes ou b) d'autres interactions cellulaires significatives pour la mutagénicité, dans les cellules
germinales de mammifères in vivo, ou c) des effets mutagènes dans les cellules somatiques de mammifères in
vivo, accompagnés d'éléments irréfutables indiquant que la substance, ou un métabolite significatif, atteint les
cellules germinales.
En ce qui concerne la classification dans la catégorie 2, on considère actuellement comme appropriées les
méthodes ci-après.
2a) Essais de mutagénicité in vivo sur cellules germinales:
— essai de mutation d'un locus spécifique,
— essai de translocation héréditaire,
— essai de mutation létale dominante.
Ces essais démontrent vraiment l'existence d'une atteinte de la descendance ou d'un défaut de développement
de l'embryon.
2b) Essais in vivo montrant une interaction pertinente avec les cellules germinales (habituellement l'ADN):
— essais d'anomalies chromosomiques, telles que détectées par analyse cytogénétique, y compris l'aneuploïdie,
provoquée par une mauvaise ségrégation chromosomique,
— essais d'échanges de chromatides sœurs,
— essais de synthèse non programmée de l'ADN,
— essai de liaison (covalente) du mutagène à l'ADN de la cellule germinale,
— essai d'autres types de défauts de l'ADN.
Ces essais fournissent des preuves plus ou moins indirectes. Leurs résultats positifs doivent normalement être
étayés par des résultats positifs tirés d'essais in vivo de mutagénicité sur cellules somatiques, chez des mammifères
ou chez l'homme [voir catégorie 3, de préférence des méthodes telles que celles du point 3 a)].
2c) Essais in vivo montrant des effets mutagènes dans les cellules somatiques de mammifères [voir point 3 a)],
en combinaison avec des méthodes toxicocinétiques ou d'autres méthodologies pouvant démontrer que le
composé ou un métabolite significatif atteint les cellules germinales.
Pour les méthodes 2 b) et 2 c), des résultats positifs d'essais avec hôte intermédiaire (host-mediated) ou la
démonstration d'effets irréfutables lors d'essais in vitro peuvent être considérés comme preuves supplémentaires.
Catégorie 3
Pour classer une substance dans la catégorie 3, il faut détenir des résultats positifs tirés d'essais montrant: a)
des effets mutagènes ou b) une autre interaction cellulaire en rapport avec la mutagénicité, dans les cellules
somatiques de mammifères in vivo. Cette dernière surtout doit normalement être étayée par des résultats positifs
tirés d'essais de mutagénicité réalisés in vitro.
En ce qui concerne les effets dans les cellules somatiques in vivo, on considère actuellement comme appropriées
les méthodes ci-après.
3a) Essais in vivo de mutagénicité sur des cellules somatiques:
— essais du micronoyau sur cellule de moelle osseuse ou analyse des métaphases,
— analyse des métaphases de lymphocytes périphériques,
— essai de taches colorées sur le pelage de souris (spot-test).