1 - EUR-Lex

L 225/240 21.8.2001
Journal officiel des Communautés européennes
FR
Le principe de cette méthode d'essai est analogue à celui de la méthode d'essai A.8 (coefficient de partage,
méthode par HPLC). La substance d'essai, en migrant dans la colonne contenant la phase mobile, interagit avec
la phase stationnaire. La répartition de la substance entre la phase mobile et la phase stationnaire contribue à
en ralentir la progression. La composition de la phase stationnaire qui comporte à la fois des sites polaires et
apolaires fait qu'une interaction est possible entre groupements polaires et radicaux apolaires d'une molécule
— à l'instar de la matière organique dans des matrices de sol ou de boues d'épuration. On peut ainsi établir
une relation entre le temps de rétention sur la colonne et le coefficient d'adsorption sur la matière organique.
Le pH exerce une influence significative, en particulier, sur le comportement de sorption des substances polaires.
En règle générale, le pH varie entre 5,5 et 7,5 dans les sols agricoles et les bassins des stations de traitement
des eaux usées. Les substances ionisables devraient être testées deux fois dans des solutions tampons
appropriées, à savoir sous leur forme ionisée et non ionisée, mais seulement si la dissociation du composé chimique
atteint au moins 10 %, à des valeurs de pH comprises entre 5,5 et 7,5.
Comme l'évaluation se fonde exclusivement sur la relation entre la rétention sur la colonne de HPLC et le coefficient
d'adsorption, il est inutile de faire appel à une méthode d'analyse quantitative, car seule la détermination
du temps de rétention est nécessaire. À condition de disposer d'une série de substances de référence appropriées
et d'appliquer des conditions expérimentales normalisées, cette méthode constitue un moyen rapide et
efficace d'estimer le coefficient d'adsorption K oc.
1.5. APPLICABILITÉ DE L'ESSAI
La méthode par HPLC convient aux substances chimiques (marquées ou non) pour lesquelles il existe un
système de détection approprié (spectrophotomètre ou détecteur de radioactivité, par exemple) et qui restent
suffisamment stables tout au long de l'essai. Elle peut s'avérer particulièrement utile pour les substances difficiles
à étudier dans d'autres systèmes expérimentaux (à savoir, les substances volatiles, les substances insolubles
dans l'eau à une concentration mesurable par analyse et les substances présentant une très grande affinité avec
la surface des récipients d'incubation). On peut également l'appliquer à des mélanges qui donnent des bandes
d'élution non résolues. Dans ce cas, il faut déterminer les valeurs limites supérieures et inférieures du log K oc
des composants du mélange d'essai.
Les impuretés risquent parfois de compliquer l'interprétation des résultats de la HPLC, mais leur importance
restera négligeable si la substance d'essai peut être clairement identifiée et séparée des impuretés par une
méthode analytique.
Après avoir été validée pour les substances énumérées au tableau 1 de l'appendice, cette méthode a été appliquée
à toute une série d'autres composés chimiques répertoriés dans les classes chimiques suivantes:
— amines aromatiques (exemples: trifluraline, 4-chloroaniline, 3,5-dinitro-aniline, 4-méthylaniline, N-méthylaniline,
1-naphthylamine),
— esters d'acides carboxyliques aromatiques (exemples: ester méthylique de l'acide benzoïque, 3,5-dinitrobenzoate
d'éthyle),
— hydrocarbures aromatiques (exemples: toluène, xylène, éthylbenzène, nitrobenzène),
— esters de l'acide aryloxyphénoxypropionique (exemples: diclofop-méthyle, fénoxaprop-éthyle, fénoxaprop-
P-éthyle),
— fongicides à base de benzimidazole ou d'imidazole (exemples: carbendazime, fubéridazole, triazoxyde),
— amides de l'acide carboxilique (exemples: 2-chlorobenzamide, N,N-diméthylbenzamide, 3,5-dinitrobenzamide,
N-méthylbenzamide, 2-nitrobenzamide, 3-nitrobenzamide),
— hydrocarbures chlorés (exemples: endosulfan, DDT, hexachlorobenzène, quintozène, 1,2,3-trichlorobenzène),
— insecticides organo-phosphorés (exemples: azinphos-méthyle, disulfoton, phénamiphos, isophenphos,
pyrazophos, sulprophos, triazophos),
— phénols (exemples: phénol, 2-nitrophénol, 4-nitrophénol, pentachlorophénol, trichloro-2,4,6-phénol,
1-naphtol),
— dérivés de la phénylurée (exemples: isoproturon, monolinuron, pencycuron),
— colorants pigmentaires (exemples: Acid yellow 219, Basic Blue 41, Direct Red 81),