situ hibridizasyon yöntemi i - Çukurova Üniversitesi

ÖZET
Melanositik Tümörlerde DNA Kopya Sayısı ve Kromozomal Değişikliklerin
Floresan İn situ Hibridizasyon Yöntemi ile Değerlendirilmesi, Ayırıcı Tanı ve
Prognostik Öneminin Araştırılması
Giriş-Amaç: Melanositik tümörler melanositlerin neoplastik proliferasyonu ile
karakterize morfolojik ve genetik yönden oldukça geniş ve heterojen spektruma sahip
tümörlerdir. Melanom, öldürücü deri tümörlerinin hemen hemen %60’ından
sorumludur. Bu nedenle melanositik tümörlerin erken tanısı ve yeni tedavi stratejilerinin
geliştirilebilmesi amacıyla, etiyopatogeneze yönelik moleküler çalışmalar giderek ivme
kazanmaktadır. Çalışmamızda özellikle tanısal güçlüğe neden olan melanositik
lezyonların tanısında 6p25, 6q23, 11q13 ve sentromer 6 genlerini hedefleyen dört renkli
FISH yönteminin tanısal değerini araştırmayı ve bu paneli kullanarak melanositik
nevüs, displastik nevüs, non-metastatik melanom ve metastatik malign melanomdaki
kromozomal anomalilerin farklılıklarını, konvansiyonel morfolojik prognostik
kriterlerle karşılaştırarak, malign melanomun biyolojik davranışındaki yerini
araştırmayı amaçladık.
Gereç-Yöntem: Çalışmaya Çukurova Üniversitesi Tıp Fakültesi Patoloji
Anabilim Dalı’nda tanı almış 74 melanositik lezyon alındı. Olguların 17’si (%23)
benign (melanositik nevüs), 28’i (%37) borderline, 29’u (%39,2) malign özellikteydi.
Borderline ve malign lezyonlar klinik takipleri olan hastaların arasından seçildi. Bu
olgulara ait formalinle fikse parafin bloklardan alınan 3 µm kalınlıktaki kesitlere FISH
prosedürü uygulandı. Sonuçlar floresan mikroskopta değerlendirilerek genlerin kopya
sayısına karşılık gelen dört farklı rengin sayısal değerleri kaydedildi.
Bulgular: FISH testi 17 melanositik nevüsün tamamında negatif; Borderline
lezyonlardan tanısal güçlük oluşturan 19 lezyonun 6’sında pozitif, diğerlerinde negatif;
11 non-metastatik melanomun 10’unda pozitif; 18 metastatik melanomun tamamında
pozitif sonuçlandı. Test sonuçlarının değerlendirilmesinde, mutlak benign ve mutlak
malign lezyonların histopatolojik tanıları esas alındı. Borderline grup lezyonların
değerlendirilmesinde klinik davranışa göre belirlenen lezyon karakteri esas alındı.
Testin sensitivitesi %98,5; spesivitesi %100 olarak belirlendi. Sinyal parametrelerinin
kantitatif değerleri benign, borderline, nonmetastatik ve metastatik gruplar arasında ikili
olarak karşılaştırıldı. 6q23 kaybı dışındaki tüm parametrelerde benzer şekilde, benign ve
borderline gruplar; borderline ve non-metastatik gruplar arasında istatistiksel olarak
anlamlı fark izlenirken; non-metastatik ve metastatik melanom arasındaki fark
istatistiksel olarak anlamsız idi. 6p25 ve 6q23 kaybı ile prognoz arasında kuvvetli ilişki;
11q13 ve 6q23 amplifikasyonu ile prognoz arasında zayıf ilişki saptandı. 6p25 (kazanım
ve kayıp) pozitifliği akral bölge (%83,3) ve alt ekstremite (%75) yerleşiminde sık
izlendi (p=0,042). 6p25 anormalliği ve 11q13 amplifikasyonu ile tümör çapı arasında
anlamlı ilişkili bulundu (sırasıyla p=0,001; p=0,046). 6q23 amplifikasyonu pozitifliği
ile mitoz arasında anlamlı ilişki saptandı (p=0,046).
IX