Chemische und Anatomische Untersuchungen zum Laubabbau in

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6.4. Anatomie 6.4.1. Anfertigung von Dauerpräparaten Fixierung und Konservierung des Materials - 40 - Material und Methoden BRAUNE et al. (1999) empfehlen zur Konservierung von Pflanzenmaterial unter anderem 70-80% Ethanol. Dadurch ist das pflanzliche Gewebe fast unbegrenzt haltbar, färbt sich jedoch mitunter durch Phlobaphene braun. Für anatomische Untersuchungen ist diese Art der Konservierung der Bearbeitung von Frischmaterial vorzuziehen, da dadurch eine bessere Schneid- bzw. Färbbarkeit gegeben ist und die Interzellularen luftfrei sind. Weiters tötet Ethanol den Protoplasten und löst das Chlorophyll aus den Zellen. Das in Costa Rica für anatomische Untersuchungen gesammelte Blattmaterial wurde in 30% vergälltem Alkohol eingelegt, um eine zu starke Härtung des Materials zu verhindern. Schnittpräparation Für anatomische Untersuchungen wurden fünf Regionen (Blattmitte, Blattstiel, Spreitengrund, Blattspitze und Blattrand) des Blattes ausgewählt. Durch diese Regionen soll der anatomische Aufbau des gesamten Blattes charakterisiert werden. An den ausgewählten Stellen wurde mit einer Rasierklinge ein ca. 1x1 cm großes Stück herausgeschnitten und für eine Stunde in einem Glycerin-Wasser Gemisch (2:1) eingelegt. Durch das Einlegen in Glycerin wird das Blattmaterial Abbildung 9: Ausgewählte geschmeidiger und lässt sich besser bearbeiten. Schnittregionen im Blatt; Quelle: eigene Die Blattstückchen wurden in Polystyrol Darstellung; eingebettet. Mit einem Reichert`schen Schlittenmikrotom (OM – E) wurden Dünnschnitte in einer Dicke von 50 – 90 µm angefertigt. Je dünner der Schnitt, umso besser lässt sich das Material im Mikroskop
- 41 - Material und Methoden untersuchen. Aufgrund der Beschaffenheit des Materials ist aber oft eine Schnittdicke unter 90 µm nicht möglich. Zum Schneiden wurde ein Mikrotommesser des Typ C verwendet. Die Schnittebene wurde senkrecht zum Mittelnerv des Blattes gewählt. Die Schnitte wurden für weiterführende Bearbeitungen in 30% Alkohol aufbewahrt. Bleichung � Bleichmittel: Natriumhypochloritlauge
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