Chemische und Anatomische Untersuchungen zum Laubabbau in

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Material und Methoden
Verholzungsgrad Mittelnerv
Der Verholzungsgrad wurde in der Region Blattmitte anhand von Digitalfotos von
Safranin-Astrablau gefärbten Schnitten in einem Bildbearbeitungsprogramm
bestimmt, indem die Fläche aller verholzten Elemente (Xylem, Sklerenchym,
verholztes Parenchym) in Relation zur Gesamtfläche ausgezählt wurde. Dazu wurdr
ein Raster über das digitale Bild gelegt und die Gesamtfläche des Mittelnervs mit
einer Rasterweite von 0,3 Einheiten, die verholzten Strukturen bei einer Rasterweite
von 0,1 Einheiten ausgezählt.
Abbildung 14: Bestimmung des Verholzungsgrades; Apeiba tibourbou Mittelnerv; Färbung Safranin -
Astrablau; 1. Mittelnerv; 2. Bestimmung der Gesamtfläche; 3. Bestimmung der Fläche mit
Verholzungen (gelb: Xylem und verholztes Parenchym, grün: Sklerenchym); Quelle: GUSENLEITNER
(2005);
Der Verholzungsgrad wurde in eine fünfteilige Skala eingeteilt, wobei 0 = 0%, 1 = 1 -
10%, 2 = 11 – 20%, 3 = 21 – 30%, 4 = 31 – 40% und 5 = 41 – 50% lignifizierte
Strukturen an der Gesamtfläche bedeutet. Die weiteren Regionen wurden mit der
Region Blattmitte verglichen und in die fünfteilige Skala eingeordnet.
Lignifizierte Strukturen sind für Mikroorganismen und Herbivore aufgrund der Struktur
des Lignins schwierig abzubauen (TAIZ, 2000). Es ist daher anzunehmen, dass der
Verholzungsgrad und die Abbaubarkeit des Blattmaterials im Wasser korrelieren.
Verholzung Spreite
Die Verholzung der Spreite abseits der Seitennerven (z.B. Parenchym oder
Spaltöffnungen) wurde an Safranin – Astrablau und durch Phloroglucin – Salzsäure
gefärbten Schnitten im Lichtmikroskop wie auch an Auramin – Mucicarmin gefärbten
Schnitten im Fluoreszenzmikroskop geprüft. Die Anwendung von drei Methoden zur
Charakterisierung der Verholzung in der Spreite ist nötig, da bei Safranin – Astrablau
gefärbten Schnitten manche Strukturen rot sein können, obwohl sie nicht lignifiziert
sind (z.B. Chloroplasten, Zellkerne). Der spezifische Ligninnachweis mit Phloroglucin