第10期 - 中华行为医学与脑科学杂志

中 华 行 为 医 学 与 脑 科 学 杂 志 2012 年 10 月 第 21 卷 第 10 期
ChinJBehavMed&BrainSci,October2012,Vol.21,No.10
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只 / 笼 , 饲 养 于 标 准 动 物 房 [ 温 度 (23±2)℃, 湿 度 (50
±5)%], 自 由 取 用 食 水 。 动 物 房 保 持 12h 白 / 昼 周 期
循 环 。 所 有 实 验 程 序 符 合 “ 国 家 健 康 研 究 所 关 于 实 验
室 动 物 保 护 和 使 用 的 指 南 ” 并 得 到 动 物 使 用 和 保 护 地
方 委 员 会 的 批 准 。
2. 实 验 设 备 : 实 验 涉 及 两 个 实 验 环 境 : 环 境 A 和
环 境 B, 均 为 以 有 机 玻 璃 板 为 主 体 结 构 的 暗 箱 。 环 境
A 底 部 为 电 栅 , 顶 部 配 以 1 个 白 炽 灯 , 每 轮 实 验 后 用
70% 乙 醇 擦 拭 ; 环 境 B 底 部 为 树 脂 平 板 , 顶 部 配 以 3 个
白 炽 灯 , 每 轮 实 验 后 用 空 气 清 新 剂 擦 拭 。 每 个 暗 箱 都
放 置 于 有 隔 音 作 用 的 箱 体 内 , 顶 部 安 装 有 红 外 摄 像 头 ,
用 于 实 验 过 程 中 摄 录 大 鼠 的 活 动 情 况 。
3. 试 剂 : 文 拉 法 辛 购 买 于 成 都 大 西 南 药 业 有 限 公
司 。 每 次 实 验 用 药 均 为 新 鲜 配 制 。 将 药 物 溶 于 生 理 盐
水 , 根 据 实 验 需 要 配 制 成 不 同 浓 度 (0,20,40mg/kg)。
给 药 方 式 为 腹 腔 注 射 。
二 、 方 法
1. 动 物 模 型 :(1) 听 觉 恐 惧 训 练 : 实 验 大 鼠 放 入 环
境 A 适 应 5min, 然 后 接 受 三 组 时 长 20s、80dB 的 声 音
刺 激 (conditionstimulate,CS), 每 组 声 音 间 隔 平 均 为
180s。 每 组 声 音 刺 激 配 以 一 组 足 部 电 击 (uncondition
stimulate,US), 持 续 1s, 强 度 为 0.7mA, 与 声 音 刺 激 同
步 结 束 。 训 练 结 束 后 立 即 将 大 鼠 放 回 饲 养 笼 。(2) 消
退 训 练 : 消 退 训 练 开 始 于 文 拉 法 辛 腹 腔 注 射 30min 后
( 单 次 注 射 , 剂 量 分 别 为 0,20,40mg/kg)。 实 验 大 鼠
在 环 境 B 内 接 受 19 次 CS 刺 激 , 刺 激 间 隔 平 均 180s。
之 后 立 即 返 回 饲 养 笼 [11] 。(3) 动 物 行 为 测 试 : 在 环 境
A/B 中 给 予 大 鼠 3 个 CS 刺 激 , 观 察 大 鼠 不 动 时 间 。
具 体 内 容 如 下 : 不 动 时 间 基 础 值 (preconditioning,Pre
C) 是 测 量 第 一 个 CS 发 生 前 30s 内 大 鼠 不 动 时 间 百 分
比 ; 恐 惧 训 练 后 (postconditioning,PostC) 和 消 退 训 练
后 (postextinction,PostT) 测 量 , 是 在 大 鼠 放 入 环 境 A/
B 适 应 5min 后 给 予 3 次 CS, 计 算 不 动 时 间 百 分 比 。
特 别 说 明 , 组 内 消 退 实 验 部 分 的 不 动 时 间 是 分 别 测 量
消 退 过 程 中 19 个 CS 刺 激 内 的 不 动 时 间 计 算 百 分 比 。
2. 实 验 设 计 :(1) 实 验 1: 急 性 文 拉 法 辛 注 射 对 听
觉 恐 惧 记 忆 消 退 的 影 响 : 组 内 消 退 和 组 间 消 退 。 本 实
验 目 的 为 研 究 文 拉 法 辛 对 听 觉 恐 惧 记 忆 消 退 的 作 用
( 图 1A)。 实 验 大 鼠 被 分 为 3 组 (0,20,40mg/kg), 每
组 8~9 只 。 实 验 第 1 天 (day1), 所 有 大 鼠 在 环 境 A
内 完 成 恐 惧 记 忆 训 练 。24h 后 (day2), 在 环 境 B 中 测
试 PreC 和 PostC。 第 3 天 (day3), 三 组 大 鼠 接 受 文
拉 法 辛 腹 腔 注 射 , 剂 量 分 别 为 (0,20,40mg/kg),
30min 后 , 所 有 大 鼠 在 环 境 B 内 进 行 消 退 训 练 , 同 时 记
录 组 内 消 退 不 动 时 间 [12] 。24h 后 (day4) 在 环 境 B 内
进 行 PostT 测 试 记 录 不 动 时 间 。(2) 实 验 2: 急 性 文 拉
法 辛 注 射 对 听 觉 恐 惧 记 忆 表 达 的 影 响 。 本 实 验 旨 在 明
确 测 试 前 给 予 文 拉 法 辛 注 射 是 否 会 影 响 已 经 获 得 的 恐
惧 记 忆 的 表 达 ( 图 2A)。 共 2 组 大 鼠 进 行 听 觉 恐 惧 记
忆 训 练 (day1)。24h 后 (day2), 所 有 实 验 大 鼠 在 环 境
B 中 进 行 PreC 和 PostC 测 试 。 第 3 天 (day3), 两 组
大 鼠 分 别 接 受 文 拉 法 辛 腹 腔 注 射 (0,40mg/kg)。
30min 后 所 有 大 鼠 在 环 境 B 内 进 行 测 试 (PostT) 并 在
24h 后 再 次 测 试 (retest,ReT), 记 录 不 动 时 间 。(3)
实 验 3: 急 性 文 拉 法 辛 注 射 对 大 鼠 自 发 活 动 的 作 用 。
本 实 验 共 有 两 组 大 鼠 , 每 组 8~9 只 。 第 1 天 (day1),
所 有 大 鼠 在 自 发 活 动 测 试 箱 内 测 试 自 发 活 动 基 础 值
(pretest,PreT)5min。 第 2 天 (day2) 两 组 大 鼠 分 别
接 受 文 拉 法 辛 腹 腔 注 射 (0,40mg/kg), 并 于 30min 后
再 次 于 测 试 箱 内 测 试 自 发 活 动 (posttest,PostT)。 第
3 天 重 复 测 试 自 发 活 动 (retest,ReT)。
3. 统 计 学 处 理 : 所 有 数 据 以 平 均 值 ± 标 准 差 表 示 。
所 有 行 为 学 实 验 数 据 均 用 SPSS16.0 统 计 软 件 进 行 统
计 。 方 差 分 析 (ANOVA) 用 于 组 间 因 素 和 组 内 因 素 统
计 分 析 。 方 差 分 析 中 显 著 作 用 的 posthoc 分 析 采 用
Turkey 检 验 。 以 P0.1) 以 及 二 者 交 互 作 用 (F 3,45 =0.346,P>0.1) 均 无
影 响 。 以 上 结 果 说 明 文 拉 法 辛 不 影 响 条 件 性 恐 惧 记 忆
的 表 达 。 见 图 2。
三 、 文 拉 法 辛 对 大 鼠 自 发 活 动 的 作 用
在 PostT 测 试 开 始 阶 段 两 组 大 鼠 在 测 试 箱 内 表 现
果