第10期 - 中华行为医学与脑科学杂志

中 华 行 为 医 学 与 脑 科 学 杂 志 2012 年 10 月 第 21 卷 第 10 期
ChinJBehavMed&BrainSci,October2012,Vol.21,No.10
·885·
成 分 (mmol·L 1 ):NaCl124,KCl3.3,NaH 2 PO 4 1.24,
MgSO 4 2.4,NaHCO 3 25.7,CaCl 2 2.4, 葡 萄 糖 10.0,pH
7.35~7.45。
2. 模 型 建 立 : 小 鼠 置 入 自 制 的 25cm ×18cm ×
18cm 有 机 玻 璃 麻 醉 箱 中 , 箱 底 铺 钠 石 灰 。 经 校 正 后
的 Ohmeda 挥 发 罐 给 予 七 氟 烷 行 麻 醉 诱 导 和 维 持 , 载
气 为 100% 氧 , 流 量 2L/min, 用 Datex 麻 醉 气 体 监 测
仪 持 续 监 测 麻 醉 箱 内 的 麻 醉 药 浓 度 , 使 箱 内 七 氟 烷 的
浓 度 维 持 在 1.5%, 并 持 续 1h。 吸 氧 组 仅 吸 入 100%
氧 。 离 体 应 用 七 氟 烷 时 , 在 预 先 加 热 加 湿 的 95% O 2
和 5% CO 2 的 混 合 气 体 中 通 入 七 氟 烷 挥 发 罐 后 在
ACSF 中 平 衡 20min, 其 浓 度 用 麻 醉 气 体 监 测 仪 上
vol% 表 示 。 用 1.5% 七 氟 烷 平 衡 后 的 ACSF 灌 流 脑 片
进 行 后 续 实 验 , 最 后 用 正 常 ACSF 冲 洗 20min。
3.Y 迷 宫 测 试 : 迷 宫 用 有 机 玻 璃 作 成 , 刷 成 灰 色 。
迷 宫 包 括 3 个 长 臂 , 每 两 个 长 臂 间 的 夹 角 为 120 度 。
每 臂 长 30cm, 高 15cm, 宽 15cm, 随 机 定 为 A 区 ,B 区 ,
C 区 。 让 小 鼠 在 其 中 自 由 活 动 , 持 续 时 间 为 8min, 并
记 录 小 鼠 进 入 各 区 的 次 序 和 次 数 。 所 谓 自 发 交 替 就 是
小 鼠 连 续 进 入 3 个 不 重 复 区 的 几 率 ( 例 如 :ABC、BCA、
CAB 等 , 而 不 是 ABA、BCB、CAC 等 )。 计 算 自 发 交 替
的 百 分 率 =( 实 际 的 自 发 交 替 值 / 最 大 可 能 自 发 交 替
值 )×100 [5] 。 小 鼠 进 入 各 区 次 数 总 和 可 以 用 来 评 估
其 活 动 能 力 。 分 别 在 吸 氧 或 吸 烷 后 12h、24h、72h 对
小 鼠 进 行 行 为 学 测 试 。
4. 群 峰 电 位 (populationspike,PS) 的 记 录 和 短 时
程 增 强 (shorttermpotentiation,STP) 的 诱 发 : 在 解 剖 显
微 镜 下 将 双 极 刺 激 电 极 置 于 来 自 CA3 区 锥 体 细 胞 的
Schafer 侧 枝 上 , 玻 璃 微 电 极 ( 内 充 2mmol·L 1 NaCl
溶 液 , 阻 抗 2~10MΩ) 置 于 CA1 区 锥 体 细 胞 层 , 记 录
电 刺 激 诱 发 的 PS。 在 实 验 中 先 行 测 试 刺 激 (testing
stimulation), 刺 激 参 数 为 单 个 脉 冲 、 波 宽 0.15ms、 强 度
为 引 起 PS 最 大 反 应 的 60% 左 右 时 的 刺 激 强 度 ( 出 现
PS 最 大 反 应 时 的 刺 激 强 度 为 最 大 刺 激 强 度 ), 待 PS 稳
定 10~15min 后 , 再 行 强 直 刺 激 (tetanicstimulation),
刺 激 参 数 为 100Hz、200 个 脉 冲 、60% 最 大 刺 激 强 度 、
波 宽 0.15ms。 给 强 直 刺 激 后 PS 幅 度 增 加 20%、 并 持
续 30min 以 上 , 即 判 定 为 短 时 程 增 强 STP 发 生 。 整 个
实 验 过 程 中 每 5min 观 察 记 录 1 次 , 至 少 30min 以 上 。
电 位 经 微 电 极 放 大 器 放 大 后 , 存 入 带 有 HXD2000 处
理 软 件 的 计 算 机 , 再 行 分 析 处 理 。
5. 统 计 学 处 理 : 分 别 观 察 各 组 的 PS 幅 度 的 变 化 情
况 。 数 据 以 x±s 表 示 , 用 成 组 t 检 验 法 进 行 两 组 间 均
数 的 显 著 性 检 验 。 以 P