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ß“π«‘®—¬<br />
«“√ “√«‘∑¬“»“ µ√å ¡¢. ªï∑’Ë 39 ©∫—∫∑’Ë 1 83<br />
1. °“√«—¥ Radical Scavenging Activity<br />
‚¥¬„â DPPH Method<br />
µ√«® Õ∫°‘®°√√¡¢Õß “√µâ“πÕÕ°´‘‡¥—π<br />
¥â«¬«‘∏’ 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl Radical<br />
Scavenging Capacity Assay ‚¥¬¥—¥·ª≈ß®“°«‘∏’¢Õß<br />
Singh et al. (2002) ‡µ√’¬¡ “√≈–≈“¬µ—«Õ¬à“ߧ«“¡<br />
‡¢â¡¢âπ·µ°µà“ß°—πÀ≈“¬§«“¡‡¢â¡¢âπ ‚¥¬‡®◊Õ®“ß “√<br />
µ—«Õ¬à“ߥ⫬πÈ”°≈—Ëπ ªî‡ªµ “√µ—«Õ¬à“ß·µà≈–§«“¡<br />
‡¢â¡¢âπ¡“ 100 ‰¡‚§√≈‘µ√ ‡µ‘¡ “√≈–≈“¬ DPPH (2,2-<br />
Diphenyl-1-picrylhydrazyl) ∑’Ë¡’§«“¡‡¢â¡¢âπ 0.1<br />
¡‘≈≈‘‚¡≈“√å ª√‘¡“µ√ 5 ¡‘≈≈‘≈‘µ√ ‡¢¬à“Õ¬à“ß√ÿπ·√ß ∑‘Èß<br />
‰«â 20 π“∑’ ·≈â«®÷ß𔉪«—¥§à“°“√¥Ÿ¥°≈◊π· ß∑’Ë<br />
§«“¡¬“«§≈◊Ëπ 517 π“‚π‡¡µ√ ·≈â«®÷ßπ”§à“°“√¥Ÿ¥°≈◊π<br />
· ß∑’ˉ¥â§”π«≥‡ªìπ % radical scavenging activity<br />
¥—ß ¡°“√∑’Ë 1 ”À√—∫ÿ¥§«∫§ÿ¡„âπÈ”°≈—Ëπ·∑π<br />
µ—«Õ¬à“ß π”§à“ % radical scavenging activity ∑’Ë<br />
√–¥—∫§«“¡‡¢â¡¢âπµà“ßÊ ¡“ √â“ß°√“ø ‡æ◊ËÕ§”π«≥À“<br />
§à“§«“¡‡¢â¡¢âπ¢Õß “√ °—¥ (°√—¡/µ—«Õ¬à“ß 1 ¡‘≈≈‘≈‘µ√)<br />
∑’Ë “¡“√∂∑”„Àâ§à“ % radical scavenging activity<br />
≈¥≈ß√âÕ¬≈– 50 (IC 50<br />
) ·≈â«π”§à“ IC 50<br />
¡“§”π«≥<br />
‡ªìπ§à“ª√– ‘∑∏‘¿“æ°“√‡ªìπ “√µâ“πÕÕ°´‘‡¥—π<br />
(Antiradical Efficiency, AE) ¥—ß ¡°“√∑’Ë 2<br />
<br />
control OD OD<br />
% radical scavenging activity <br />
sample 100 ----<br />
control OD<br />
<br />
1<br />
‡¡◊ËÕ control OD = §à“°“√¥Ÿ¥°≈◊π· ߧ«∫§ÿ¡<br />
sample OD = §à“°“√¥Ÿ¥°≈◊π· ߢÕß “√µ—«Õ¬à“ß<br />
1<br />
AE <br />
---- 2<br />
IC 50<br />
‡¡◊ËÕ AE = Antiradical Efficiency<br />
IC 50<br />
= §«“¡‡¢â¡¢âπ¢Õß “√∑’Ë “¡“√∂∑”„Àâ§à“ % radical scavenging activity ≈¥≈ß<br />
√âÕ¬≈– 50<br />
2. °“√«—¥§ÿ≥ ¡∫—µ‘„π°“√µâ“πÕπÿ¡Ÿ≈Õ‘ √–<br />
¥â«¬«‘∏’ Measurement of reducing power<br />
°“√«—¥ reducing power ¢Õßµ—«Õ¬à“ß∑”°“√<br />
µ√«®«—¥µ“¡«‘∏’¢Õß Oyaizu (1986) ‚¥¬π”µ—«Õ¬à“ß<br />
ª√‘¡“µ√ 2.5 ¡‘≈≈‘≈‘µ√ º ¡°—∫ sodium phosphate<br />
buffer (pH 6.6) §«“¡‡¢â¡¢âπ 200 ¡‘≈≈‘‚¡≈“√å ª√‘¡“µ√<br />
2.5 ¡‘≈≈‘≈‘µ√ ·≈– potassium ferricyanide §«“¡‡¢â¡<br />
¢âπ√âÕ¬≈– 1 ª√‘¡“µ√ 2.5 ¡‘≈≈‘≈‘µ√ ·≈â«π” “√º ¡<br />
‰ª incubate ∑’ËÕÿ≥À¿Ÿ¡‘ 50 Õß»“‡´≈‡´’¬ ‡ªìπ‡«≈“<br />
20 π“∑’ ®“°π—Èπ‡µ‘¡ TCA §«“¡‡¢â¡¢âπ√âÕ¬≈– 10<br />
ª√‘¡“µ√ 2.5 ¡‘≈≈‘≈‘µ√ ·≈â«π”¢Õߺ ¡‰ªÀ¡ÿπ‡À«’ˬß<br />
∑’Ë 650 g ‡ªìπ‡«≈“ 10 π“∑’ π” “√≈–≈“¬ à«π∫π<br />
ª√‘¡“µ√ 5 ¡‘≈≈‘≈‘µ√ ¡“‡µ‘¡πÈ”°≈—Ëπ ª√‘¡“µ√ 5 ¡‘≈≈‘≈‘µ√<br />
·≈– ferric chloride §«“¡‡¢â¡¢âπ√âÕ¬≈– 0.1 ª√‘¡“µ√<br />
1 ¡‘≈≈‘≈‘µ√ ·≈â«π”‰ª«—¥§à“°“√¥Ÿ¥°≈◊π· ß∑’˧«“¡<br />
¬“«§≈◊Ëπ 700 π“‚π‡¡µ√<br />
º≈·≈–«‘®“√≥å<br />
°“√»÷°…“°“√‡°‘¥ªØ‘°‘√‘¬“ ’πÈ”µ“≈<br />
®“°°“√»÷°…“°“√‡°‘¥ªØ‘°‘√‘¬“ ’πÈ”µ“≈ ‚¥¬«—¥<br />
UV-absorbance ·≈–§«“¡‡¢â¡¢Õß°“√‡°‘¥ ’πÈ”µ“≈<br />
¢Õß “√º ¡√–À«à“߉§‚µ·´π·≈–πÈ”µ“≈ πÈ”µ“≈<br />
‡¥’ˬ«Ê ·≈–‰§‚µ·´π‡¥’ˬ«Ê ∑’ËÕÿ≥À¿Ÿ¡‘ÀâÕß ‚¥¬<br />
°“√«—¥¢—Èπ°“√‡°‘¥ “√µ—«°≈“ߢÕß nonenzymatic