6.2 中药学（H28） - 国家自然科学基金委员会医学科学部

会 议 报 告 : 国 际 大 会 : 0 分 组 : 0 国 内 大 会 : 0 分 组 :4培 养 人 才 : 博 士 后 : 0 博 士 : 0 硕 士 : 3应 用 假 病 毒 技 术 筛 选 抗 H5N1 禽 流 感 病 毒 活 性 的 有 效 治法 及 其 动 物 保 护 作 用项 目 批 准 号 : 30873264项 目 负 责 人 : 聂 广依 托 单 位 : 广 东 医 学 院本 项 目 的 研 究 内 容 主 要 包 括 以 下 三 个 方 面 :(1)H5N1 禽 流 感 假 病 毒 的 构 建 ;(2) 不同 治 法 中 药 血 清 对 假 病 毒 体 外 抑 制 试 验 ;(3) 不 同 治 法 中 药 对 攻 毒 小 鼠 的 体 内 保 护 作 用 。首 先 我 们 采 用 RT-PCR 的 方 法 成 功 克 隆 A/Shenzhen/406H/06(H5N1) 株 的 全 基 因 片 段 , 并 将 囊膜 蛋 白 HA、NA 基 因 成 功 克 隆 至 真 核 表 达 载 体 CMV/R, 在 优 化 转 染 体 系 及 转 染 条 件 后 协 同转 移 载 体 、 包 装 载 体 共 转 染 293T 细 胞 , 制 备 整 合 HA、NA 蛋 白 的 具 有 广 谱 宿 主 范 围 假 型 逆 转录 病 毒 。 成 功 建 立 基 于 假 病 毒 系 统 的 体 外 中 和 试 验 平 台 , 并 对 两 例 H5N1 禽 流 感 患 者 恢 复 期血 清 中 和 效 价 进 行 评 估 。 通 过 在 不 同 时 间 点 加 入 药 物 血 清 , 观 测 复 方 血 清 对 HA 蛋 白 、 唾 液酸 α-2,3- 半 乳 糖 苷 受 体 、NA 蛋 白 的 抑 制 作 用 , 发 现 药 物 血 清 在 体 外 对 上 述 3 个 靶 点 蛋 白 均无 影 响 。 动 物 体 内 实 验 发 现 对 病 毒 感 染 的 BALB/C 小 鼠 灌 服 中 药 进 行 ― 截 断 扭 转 ‖, 凉 血 组 中药 对 小 鼠 具 有 55.6% 的 保 护 率 。 结 论 如 下 :4 种 治 法 的 复 方 中 药 在 体 外 不 能 直 接 抑 制 病 毒 ,但 在 体 内 凉 血 法 中 药 却 可 以 通 过 调 节 机 体 免 疫 系 统 发 挥 对 攻 毒 小 鼠 的 保 护 效 果 。关 键 词 :H5N1 禽 流 感 ; 假 病 毒 ; 中 药发 表 论 著 :1. 张 国 良 , 聂 广 , 周 伯 平 . H5N1 禽 流 感 假 病 毒 体 外 中 和 试 验 技 术 平 台 的 建 立 与 应 用 . 中 华临 床 感 染 病 杂 志 , 2011, 4(2):91-952. Zhang GL, Xia Z, Nie G. Epidemiological and clinical features of 308 hospitalized patientswith novel 2009 influenza A(H1N1)virus infection in China during the first pandemic wave.Intervirology, 2010, 54(3):164-1703. 刘 红 , 张 国 良 , 聂 广 . 假 病 毒 技 术 在 抗 H5N1 禽 流 感 病 毒 中 药 筛 选 中 应 用 与 评 价 . 中 西 医结 合 学 报 , 2010, 8(11):1036-10404. 张 国 良 , 蔡 车 国 , 聂 广 . 整 合 深 圳 人 源 H5N1 禽 流 感 病 毒 分 离 株 HA 蛋 白 的 逆 转 录 病 毒 的93